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液相示差检测器测糖出现倒峰是怎么回事?(有图)

液相色谱(LC)


  • 流动相条件是乙腈:水=70:30,流速1.0ml/min,进样量20ul,柱温30℃,柱子是shodex的NH2P-50 4E,4.6*250mm,液相仪器及检测器是waters的
    混合标准品和样品都是先用水溶解再加乙腈配成70%乙腈。
    但是为什么都是出现这样的图谱呢???有谁碰到过这样的情况吗?可以指教一下吗?谢谢!!!
    下面这张是检测单糖,也是这样做的就好的
  • 该帖子已被版主-有水有渝加5积分,加2经验;加分理由:图文求助,积极回复
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  • 有水有渝

    第1楼2012/08/13

    应助达人

    第一个图是进了什么得到的,溶剂吗?

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  • wanttofly

    第2楼2012/08/13

    第一个不知道是不是压力降引起的,你用空白流动相进一针看看

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  • zhaohua8011

    第3楼2012/08/13

    第一个图比较异常,极性接反了吗?

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  • chy57589893

    第4楼2012/08/13

    示差检测器出现负峰的现象是有的,由示差的原理可以知道,只要样品和流动相液体的折光率有差别就能出峰,如果出现的是负差别就会出现负峰,由图可以看到检测器没有问题,只能说明在3分钟左右检测器通过了一个物质,出现了负峰,但应该对被测组分(保留时间是2.4、3.7和4.5分钟吧)没有影响,那就让他出吧.呵呵

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  • sally0326

    第5楼2012/08/13

    确实是这样的,所以楼主你检查下你的仪器;通常示差检测器上面会有个校正负峰的按键,按下就可以了

    chy57589893(chy57589893) 发表:示差检测器出现负峰的现象是有的,由示差的原理可以知道,只要样品和流动相液体的折光率有差别就能出峰,如果出现的是负差别就会出现负峰,由图可以看到检测器没有问题,只能说明在3分钟左右检测器通过了一个物质,出现了负峰,但应该对被测组分(保留时间是2.4、3.7和4.5分钟吧)没有影响,那就让他出吧.呵呵

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  • jizhe1987

    第6楼2012/08/13

    进的混合标准品和我做的样品,都是这样。今天分别用水和70%乙腈溶解样品再走还是这样。

    有水有渝(xky0230699) 发表:第一个图是进了什么得到的,溶剂吗?

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  • jizhe1987

    第7楼2012/08/13


    进空白70%乙腈流动相如上图。后来分别进了纯的乙腈及纯的去离子水,图分别如下。
    纯乙腈
    纯去离子水

    wanttofly(yaofei) 发表:第一个不知道是不是压力降引起的,你用空白流动相进一针看看

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  • jizhe1987

    第8楼2012/08/13

    没有接反,因为我进了单糖样品有峰的。如下图。

    这是用70%乙腈溶的。下面一个是纯水溶解的。
    用水溶解的在前面会多出一个峰。

    zhaohua8011(zhaohua8011) 发表:第一个图比较异常,极性接反了吗?

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  • jizhe1987

    第9楼2012/08/13

    对的,我要的第一个峰是4.5左右,后面还有。但是关键是出完这些之后等20分钟也都是平的。6月份我做过一次是在15分钟之前峰会出来。混标可以出来5、6个。我怀疑会不会是我混合标准品之间发生了反应?但是做薄层层析点样是没有什么变化的。一个一个点分的还是挺好的。

    chy57589893(chy57589893) 发表:示差检测器出现负峰的现象是有的,由示差的原理可以知道,只要样品和流动相液体的折光率有差别就能出峰,如果出现的是负差别就会出现负峰,由图可以看到检测器没有问题,只能说明在3分钟左右检测器通过了一个物质,出现了负峰,但应该对被测组分(保留时间是2.4、3.7和4.5分钟吧)没有影响,那就让他出吧.呵呵

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  • jizhe1987

    第10楼2012/08/13

    如果是接反了那么测别的物质应该也是反的,为什么测单糖又是好的呢。所以应该没有反吧。

    sally0326(sally0326) 发表:确实是这样的,所以楼主你检查下你的仪器;通常示差检测器上面会有个校正负峰的按键,按下就可以了

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