新柱高浓度样品时峰分裂

1、waters XBridgeTM Shield RP18 碳链载量没有一般的C18的高，明显此柱容易过载，对比0.8mg/ml和4mg/ml的图可知；
2、此柱的优势是耐高水相，对极性物质的保留会增强，因此与其他的C18相比，出峰顺序会可能有部分颠倒，对比最后两张图，你的杂质的出峰时间明显后推；
3、C18有含碳量低中高三种类型，这三种柱子的保留行为差异较大，要针对你的分析物的性质来选柱子，不光要看品牌，还要看的系列，不同系列的优劣各异。

不知道楼主用何种溶剂溶解的样品？样品貌似在死时间出峰，怀疑有较强的溶剂效应。另外，样品浓度太高，而且进样量也太大，估计会过载。

柱子选择性 区别很大的，毕竟填料是不一样，

不同公司同类别的柱子差异也比较明显，新柱需要按规定冲洗后才能使用。
样品过载会造成图谱比较难看。结果是没有分裂但是出现拖尾现象。

样品是用纯乙腈溶解的，是做有关物质检查，样品1是供试品，样品2是1%自身对照，所以样品1的浓度比较高。
这个分析方法是成熟的方法，第一张图和第四张图是同一个样品，都是用的 XBridgeTM Shield RP18的柱子，只不过图1用的是新柱，图4用的是旧柱子。另外一个区别就是新柱是在国内买的，旧柱是在美国买的。但是外包装和说明书都是一样的，除了批号不同。
waters的人让试试中间浓度，2mg/ml的样品，我再试试看吧。
这是奇了怪了。。。

浓度为4mg/ml的样品，分别进样50μl，40μl，30μl，20μl，10μl。信号1-5分别对应进样量50μl~10μl。


可以看到主峰的峰高未见明显变化，但是前面的不知道什么峰逐渐回归正常。10μl时峰形正常。
目前原因仍是未知。