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求助!用过磷酸盐和乙腈混合成的流动相后该怎么冲洗和保养柱子??

液相色谱(LC)

  • 如题
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  • 茅茅

    第1楼2006/05/23

    先用相同比例的水-乙腈0.8-1ml/min冲洗40min,再用乙腈-水(70:30)代替。假如柱子长期不用,就要用纯甲醇或乙腈替换。

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  • gchplc

    第2楼2006/05/23

    好的,谢谢大侠!

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  • ahwyq

    第3楼2006/05/23

    应该是用二次蒸馏水小流量冲洗或者水+甲醇或者水加乙腈,都是可以的,不过没有纯水冲洗的时间短,然后在用纯甲醇或乙腈冲洗呀

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  • maya0725

    第4楼2006/05/23

    我做的样品是用磷酸二氢钠和乙腈,水做流动相的,看似和你的很像。
    保养的方法是这样的:
    如果着急用的话,比如今天做完,明天早上要用的话,就用小流速的纯水冲洗,明天早上就直接用。
    如果不着急用的话,一般用水+甲醇(乙腈)按照规定检测样品的流速的一半来冲洗,(推荐:水+甲醇比例为1:1,水+乙腈比例为2:8),一般为1-2小时,然后用纯甲醇或者乙腈来冲洗,也有用小流速的水+甲醇来冲洗一晚上。
    如果拖尾严重的话,清洗的方法是:
    水;水/甲醇(50:50);甲醇;水/甲醇(50:50);水
    如果要保存柱子的话,清洗后,用甲醇饱和一个晚上,或者24小时然后存放。

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  • waters2000

    第5楼2006/05/23

    不错!不错!呵呵

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  • naya

    第6楼2006/05/23

    上面几位大侠介绍的方法都是可行的,没有原则性错误,但我有以下几点不同看法,供大家参考和指正:
    ① 对于ODS柱,使用缓冲盐流动相后,必须冲洗,其目的是为了避免停留在流路中的盐类析出,造成管路堵塞和盐结晶损伤柱子固定相;
    ② 一般使用5%-10%甲醇+90%-95%水冲洗30-40分钟,再用100%甲醇冲洗30分钟,如有时间二者可以加长;
    ③ 添加5%-10%甲醇,是为了携带水分进入固定相表面的孔隙内,以便冲洗彻底,孔隙口有疏水性,100%水不容易进入;
    ④ 添加的甲醇等有机相太高时,如上面提到的50%比例,可能会容易造成盐类析出,同时也不经济;
    ⑤ 乙腈的毒性和价格都比甲醇高,作为冲洗目的的洗涤,还是用甲醇好。

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  • amoeba1982

    第7楼2006/05/24

    我们一般用水甲醇(20:80)冲洗1小时以上,再转为纯甲醇冲洗30分钟!不过发现经常使用缓冲盐的柱子,寿命比较短,不知是不是因为流动相切换过于频繁。

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  • tianru的爸爸

    第8楼2006/05/24

    主要是更换流动相时没有达到平衡,建议更换流动相时,用互溶性很好的溶剂作媒介,至少平衡10个柱床体积。

    amoeba1982 发表:我们一般用水甲醇(20:80)冲洗1小时以上,再转为纯甲醇冲洗30分钟!不过发现经常使用缓冲盐的柱子,寿命比较短,不知是不是因为流动相切换过于频繁。

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  • znw811129

    第9楼2006/05/24

    对于ODS柱,使用缓冲盐流动相后,必须冲洗,其目的是为了避免停留在流路中的盐类析出,造成管路堵塞和盐结晶损伤柱子固定相;
    一般使用5%-20%甲醇+80%-95%水冲洗30-60分钟,再用100%甲醇冲洗30-60分钟,如有时间二者可以加长;
    不能直接用纯水冲,那样会把硅胶冲塌掉,注意啊!
    添加的甲醇等有机相太高时,如上面提到的50%比例,可能会容易造成盐类析出,同时也不经济;
    乙腈的毒性和价格都比甲醇高,作为冲洗目的的洗涤,还是用甲醇好。
    一般柱子保存2-3个月都应再纯溶剂冲洗一次,防止报废。

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  • dab_3747

    第10楼2006/05/24

    同意4楼得说法
    我用得是ODS柱,反相,也用过缓冲盐加乙腈加水做流动相,我每天用完就用10%甲醇冲洗大概20分钟,再用纯甲醇冲洗30分钟,第二天来用时一般还要用纯甲醇再跑15分钟左右,效果很好,从经济适用角度来说甲醇比乙腈冲洗好。
    用缓冲盐要特别注意,一定要把柱子洗干净。

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