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C18柱分离天冬氨酸

  • jennyfu311
    2012/11/08
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 大家好!我们实验室正试着用C18柱分离天冬氨酸(其紫外最大吸收处是波长230nm)我们的柱长型4.6*150mm,紫外检测器,流动相是90:10水和乙腈,做不出东东来。请问各位高手,有没有什么好办法
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  • liuwei10987

    第1楼2012/11/08

    如果方法不成熟,最好用梯度洗脱,确保样品中所有组分都洗脱下来。

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  • ins0mnia2010

    第2楼2012/11/08

    极性强,难分离,摩尔吸收系数也不高,换了流动相也没用,做氨基酸都用GC或者氨基酸分析仪做

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  • maqingtie

    第3楼2012/11/08

    没有紫外吸收,当然没峰了。浓度放大。低波长200nm试试看

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  • houjjun

    第4楼2012/11/08

    用荧光检测器,或衍生法

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  • 三人行

    第5楼2012/11/09

    1.1仪器高效液相色谱仪(Alltech):包括426HPLC泵,蒸发光散射(ELSD)2000检测器等;TGL-16G冷冻离心机;电子天平;LG冰箱。
    1.2试剂乙腈:色谱纯,CaledonLaboratories公司;L-天冬氨酸:Sigma公司;三氟乙酸:AR,国药集团化学试剂有限公司;七氟丁酸:AR,Fluka公司;所用水:Milli-Q纯水机制备。
    1.3色谱条件色谱柱:AlltechPrevailC18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:0.14%三氟乙酸(含0.06%七氟丁酸)溶液-乙腈溶液(80∶20);流速0.9mL/min;。检测器:ELSD2000Alltech;ELSD参数:漂流管温度110℃,载气(氮气)流速2.6L/min;进样量20μL;柱温25℃

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