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婴幼儿奶粉中双氰胺的检测解决方案

省部重点实验室

2013/02/20

食品安全/营养与健康

近日，有媒体报出新西兰牛奶中发现了有害物质——双氰胺。双氰胺又名二氰二胺，缩写DICY或DCD。据了解，高剂量的双氰胺对人体是有毒的，然而，相关国际标准尚未对双氰胺在食品中的限量做出规定，所以，DCD事件一时间引起了全世界的高度关注和担忧。

针对此次奶制品的突发事件，月旭科技采用公司新一代的Welchrom^®QuChERS-双氰胺净化管（500 mg/15 mL，货号：00539-20020）和Ultimate^®Polar-RP液相色谱柱，建立了奶粉中双氰胺的QuEChERS快速前处理方法和LC-UV检测方法，为广大客户提供最有力的技术支持。

一、仪器、试剂与材料

高效液相色谱仪，涡旋振荡器，超声波清洗机，氮吹仪。

双氰胺标准品（CAS：461-58-5；FW=84.08），新一代Welchrom^®QuChERS-双氰胺净化管，Ultimate^®Polar-RP液相色谱柱，微孔滤膜，乙酸铵、乙酸、乙腈为色谱纯，实验用水为超纯水。

二、实验步骤

1. 称取1 g 试样于50 mL 具塞离心管中。
2. 加2 mL 水，涡旋30 s，加2 ml 乙腈涡旋30 s。
3. 再往现有的提取液中加2 mL 乙腈，重复上述提取步骤。
4. 再将该提取步骤重复2次，得到共计约10 mL 的提取液。
5. 以4 000 r/min 离心5 min，将全部上清液加入新一代Welchrom^®QuChER管中（500mg/15mL）。
6. 将净化管上下晃动30 s，然后涡旋30 s 后，10 000 r/min离心5 min。
7. 取全部上清液（约10 ml）于玻璃试管中，50℃氮气吹干，加入1 ml 乙腈复溶，过0.22 μm 微孔滤膜，待测。

注：
1. 做基质加标实验时的标准溶液建议选择以水为溶剂，防止加标瞬间发生蛋白沉淀；

2. 乙腈提取分4次，为防止乙腈体积过多时沉淀蛋白速度过快，影响提取效果。

三、实验条件

1. 高效液相色谱法（HPLC法）：
色谱柱：月旭Ultimate^®Polar-RP，4.6×250 mm，5 μm（货号：00215-31043）；

流动相：10 mmol/L 乙酸铵（乙酸调节pH=4.0）；

波长：220 nm；

进样量：10 μl；

柱温：30℃；

流速：0.8 mL/min。

四、结果图片
1. 空白溶剂

2. 双氰胺：0.1076 μg/ml

3. 空白样品图：

4. 奶粉中添加0.5 ug/ml色谱图：

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