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检定菌传代标准操作规程(SOP)

省部重点实验室

2013/06/11

生命科学仪器综合讨论

名称：检定菌传代标准操作规程(SOP)
关键词：检定菌传代
目的：为规范检定菌传代操作
背景知识：无
原理：无
主体内容：
1．器具和培养基
1．1 营养琼脂斜面 5支
1．2 接种环
1．3 酒精灯
1．4 酒精棉
1．5 试管架
1．6 菌种管
2．操作步骤
2．1 将菌种管放入百级层流罩内。
2．2 用记号笔在营养琼脂斜面试管上，写上将要接种的菌名或菌号、日期、代次。
2．3 将试管棉塞旋松，点燃酒精灯。
2．4 将菌种管及待接种的斜面试管并排放置在左手的食指、中指和无名指之间，斜持试管呈45度。两个试管口要平齐，斜面朝上，用拇指按住试管的基部。
2．5 右手握在接种环的胶木柄上，将镍铬丝环口和其余部分在火焰的氧化焰部位烧红，然后将接种环的金属柄也通过火焰两三次，以杀死杂菌。
2．6 用右手无明指和小指及掌边先后夹住两支试管的棉塞，在火焰旁轻轻地拔开，同时将管口通过火焰两三次，然后让试管稍离火焰，应保持水平状态，以防杂菌落入管内。
2．7 将烧红的接种环伸入菌种管中，先接触无菌苔生长的培养基上，令其冷却后挑取少许菌苔移至待接种试管斜面上，自基部开始向上划致密的平行线。接种完毕，移出接环，同时将两支试管口依次过火，最后塞上棉塞，并将试管插在试管架，充分灼烧接种环。
2．8 按以上步骤，接种下一支斜面。
2．9 接种好的斜面竖直放在37℃培养箱中培养24～48小时。
2.10 观察菌落生长情况，48小时苔菌落长出，取出置于冰箱4℃保藏，每一个月传代一次。
2.11 杀灭第一代菌种，121℃蒸汽灭菌1小时。

分
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