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检定菌传代标准操作规程(SOP)
省部重点实验室
2013/06/11
私聊
生命科学仪器综合讨论
名称:检定菌传代标准操作规程(SOP)
关键词:检定菌传代
目的:为规范检定菌传代操作
背景知识:无
原理:无
主体内容:
1.器具和培养基
1.1 营养琼脂斜面 5支
1.2 接种环
1.3 酒精灯
1.4 酒精棉
1.5 试管架
1.6 菌种管
2.操作步骤
2.1 将菌种管放入百级层流罩内。
2.2 用记号笔在营养琼脂斜面试管上,写上将要接种的菌名或菌号、日期、代次。
2.3 将试管棉塞旋松,点燃酒精灯。
2.4 将菌种管及待接种的斜面试管并排放置在左手的食指、中指和无名指之间,斜持试管呈45度。两个试管口要平齐,斜面朝上,用拇指按住试管的基部。
2.5 右手握在接种环的胶木柄上,将镍铬丝环口和其余部分在火焰的氧化焰部位烧红,然后将接种环的金属柄也通过火焰两三次,以杀死杂菌。
2.6 用右手无明指和小指及掌边先后夹住两支试管的棉塞,在火焰旁轻轻地拔开,同时将管口通过火焰两三次,然后让试管稍离火焰,应保持水平状态,以防杂菌落入管 内。
2.7 将烧红的接种环伸入菌种管中,先接触无菌苔生长的培养基上,令其冷却后挑取少许菌苔移至待接种试管斜面上,自基部开始向上划致密的平行线。接种完毕,移出接环,同时将两支试管口依次过火,最后塞上棉塞,并将试管插在试管架,充分灼烧接种环。
2.8 按以上步骤,接种下一支斜面。
2.9 接种好的斜面竖直放在37℃培养箱中培养24~48小时。
2.10 观察菌落生长情况,48小时苔菌落长出,取出置于冰箱4℃保藏,每一个月传代一次。
2.11 杀灭第一代菌种,121℃蒸汽灭菌1小时。
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