(*_*)求证：关于 药典 流动相 的配制(*_*)

760ml纯化水+0.76/0.85=0.9ml磷酸（除以0.85是因为磷酸的含量是85%）
以前的同事还有这样配制的
0.76/1.69=0.45ml的
0.76是质量，1.69是磷酸的密度
算出来的0.45就是移取得磷酸体积
这个又对不？？？

取1000ml纯化水+1ml磷酸+4g辛烷磺酸钠

再量取760ml0.4%辛烷磺酸钠的0.1%磷酸溶液+240ml乙腈

我是这么认为，但是不知道你是否对比过2个配法对出峰有什么区别

我们配的时候一般如果是液体的话都是按照体积比配的，如果是固体就按照质量体积比配，楼主所说的流动相比例是24:76，我们一般只配760

是质量分数的

公布下我试验的：
①：取1000ml纯化水+1ml磷酸+4g辛烷磺酸钠

再量取760ml0.4%辛烷磺酸钠的0.1%磷酸溶液+240ml乙腈
——这样的出峰时间是34min，分离度忘了，不过肯定大于2
②以前的同事还有这样配制的
0.76/1.69=0.45ml的
0.76是质量，1.69是磷酸的密度
算出来的0.45就是移取得磷酸体积——这个的出峰时间是55min，分离度5.9

怎么磷酸影响保留时间这么多？其他条件和参数都一样的~

保留时间长了，分离度肯定大，如果分离度达到，我会选出峰快的，保留时间长，峰有可能会扩散，造成理论塔板数降低

分离度不是越大越好，只要达到要求，尽量缩短分析时间，提高效率

首先，按照药典的方法来看，一般来说1%磷酸是体积比，辛烷磺酸钠是质量比，所以第一种配置方法应该比较准确。

其次，你分析的是一种碱性化合物，用的是离子对色谱法，碱性化合物解离带正电荷，因此需要一种能够解离成负电荷的离子对试剂与其结合成中性化合物以增强保留。而带有磺酸基的辛烷磺酸钠就是一个常用离子对试剂。

RSO3-NA+

第一种方法相对第二种方法来说，你磷酸加入的量多了，ph值肯定变得低了，低ph会促进碱性化合物的解离，也就是说会减少了化合物流出的保留时间，因此你分析时间也就缩短了。至于你说的分离度问题，保留时间增加了，分离度肯定也会相应增加一些。分析肯定是以分离度合适的前提下尽量的缩短分析时间为宜。

对于离子对色谱法来说，流动相的 PH 值、离子对试剂的种类和浓度、有机溶剂的种类和浓度、缓冲盐、柱温等因素都会对分离产生很大影响。

我认为新GMP上说的方法是正确的