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谈谈GC中的程序升温和HPLC中的梯度洗脱

老多_小多

2013/10/08
药物分析

气相色谱（GC）

在气相色谱中，为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期，广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中对组分复杂的样品则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中，按一定程序不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。

程序升温，是色谱柱的温度按设置的程序连续地随时间线性或非线性逐渐升高，以使低沸点组分和高沸点组分在色谱柱中都有适宜的保留、色谱峰分布均匀且峰形对称。程序升温可以多阶。

程序升温示意图

梯度洗脱，是通过改变通过色谱柱的流动相，让流动相连续的随时间线性或非线性的变化。梯度洗脱主要用于被分离组分复杂，且正常方法洗脱时间过长的情况，梯度洗脱可以显著缩短分析时间，并且比一般方法分离得到的峰个数多，分离度更好，一个方法，梯度可以变化多次。

梯度示意图（A、B表示流动相比例）

色谱分析，面对复杂的混合物，要让多组分分离，通常在GC色谱分析中，会采用程序升温；同样在HPLC中，就采用梯度洗脱，让复杂组分得到分离。如图，比较可以看出，用恒温分析和程序升温分析有很大的区别。

梯度洗脱也可以把等度分不开的色谱峰，通过改变流动相比例来调整分离度。程序升温气相色谱都可以实现，而梯度洗脱，高压泵液相则需要2个泵来走不同的流动相改变比例，低压泵则可以通过比例阀来改变流动相组成。
随着分析的物质越来越复杂，程序升温和梯度洗脱应用越来越多，把这两个方法运用得当，都可以获得理想的色谱峰。

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环城死水

第1楼2013/10/08

支持一下，学习了！

0

雨木霖

第2楼2013/10/08

那么这文章的结论呢？

0

老多_小多

第3楼2013/10/08

要什么结论，一个气相，一个液相，本来就不能比
其实这2个方法都是一个原理变的
雨木霖(mickeylin) 发表:那么这文章的结论呢？

0

wn3367898

第5楼2013/10/08

气相用程序升温的多，液相梯度洗脱的多吗？

0

zyl3367898

第6楼2013/10/08

应助达人

液相用梯度洗脱效果很好。

0

安平

第7楼2013/10/08

应助达人

非线性的程序升温，支持此功能的GC或者GCMS仪器多不多？大概有那几款？

0

Doraemon

第8楼2013/10/10

气相和液相都有流速梯度的。原理类似

0

石头记忆

第9楼2013/10/10

老多的科普文章，赞！

0

valorb

第10楼2013/10/10

呵呵，基础知识，供新手了解

0

老多_小多

第11楼2013/10/11

梯度洗脱也用的很多，特别是分析复杂样品
wn3367898(v2782436) 发表:气相用程序升温的多，液相梯度洗脱的多吗？

0

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