纳豆冻干粉和水飞蓟片GB微生物培养

唉，微生物版面缺少版主啊，这么好的问题，就是缺少版主了

是不是霉菌？

玫瑰红钠琼脂培养基(Rose Bengal AgarⅡ)

用 途：

供药品和生物制品中霉菌和酵母菌的计数、分离和培养用。（《中华人民共和国药典》2010年版）

原 理：

胨提供碳源和氮源；葡萄糖提供能源；磷酸二氢钾为缓冲剂；硫酸镁提供必须的微量元素；玫瑰红钠作为选择性抑菌剂可抑制细菌的生长，并可减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长；琼脂是培养基的凝固剂。

配方（每升）：

胨 5.0g

葡萄糖 10.0g

磷酸二氢钾 1.0g

硫酸镁 0.5g

玫瑰红钠 0.0133g

琼脂 14.0g

最终pH 6.0±0.2

使用方法（计数用法）：

1、 称取本品30.5g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min。

2、 检样的稀释处理，略。

3、 根据对样品污染情况的估计，选择3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1.0mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2～3个平皿。

4、 将凉至45℃左右的培养基约15mL注入平皿中，待琼脂凝固后，倒置于23～28℃温箱中培养72h，对于菌落微小点计困难的平板可延续培养到4～5d再进行观察计数。

5、 计数、报告：

（1） 计数：一般情况下，玫瑰红钠平板计点霉菌或酵母菌数，如在该平板上生长的细菌菌落数多于营养琼脂平板上生长的菌落数时，则应同时点计细菌数，并将该菌数作为供试品的细菌数报告。固体供试品在玫瑰红钠琼脂平板上点计霉菌落数，液体供试品则需在玫瑰红钠琼脂平板上点计霉菌与酵母菌菌数；含蜂蜜及王浆的合剂需以玫瑰红钠平板的霉菌菌落数加上酵母膏粉胨葡萄糖琼脂平板的酵母菌菌落数作为供试品的霉菌、酵母菌总数。

（2） 报告：通常选择菌落数在30～100之间的稀释级的平板计数，以该稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告。

质量控制：

本品倾注平皿后呈玫瑰红色，下列菌株接种后23～28℃培养72h生长情况如下表。

菌 名 菌 号 生长状况 菌落特征

黑曲霉 CMCC(B)98003 良好 菌丝白色孢子黑色，底部玫瑰红色

白色念珠菌 CMCC(B)98001 良好 菌落表面呈奶油色

大肠埃希氏菌 CMCC(B)44102 被抑制 ——

贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

参考文献：

1. 《中华人民共和国药典》2010年版，附录XI J 微生物限度检查。

伊红美蓝培养基




原理

当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色，再与美蓝结合形成紫黑色菌落，并带有绿色金属光泽。而产气杆菌则形成呈棕色的大菌落。

在碱性环境中不分解乳糖产酸的细菌不着色，伊红和美蓝不能结合，故沙门氏菌等为无色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培养基上不生长。

常用的伊红美蓝乳糖培养基，可用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌。如果有大肠杆菌，因其强烈分解乳糖而产生大量的混合酸，菌体带H+，故菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。

2鉴定方法

用伊红美蓝培养基鉴定水中大肠杆菌

步骤如下：

①制作伊红美蓝培养基，趁热注入培养皿中，凝成平板，待用。

②用灭过菌的锥形瓶盛取河水或沟水，按1：10稀释。

③取0.1毫升稀释液接种于伊红美蓝培养基上。用平板划线分离法进行分离。

④将划线后的培养皿倒置37℃温箱中培养18～24小时。培养基中会出现大肠杆菌菌落，菌落中心呈暗蓝黑色，发金属光泽。

⑤将菌落接种于斜面培养基上（由营养琼脂培养基制成）。

3配置方法

配方

蛋白胨 10g

乳糖 10g

磷酸氢二钾 2g

琼脂 20~30g

蒸馏水 1000ml

2%伊红水溶液 20ml

0.5 %美蓝水溶液 13ml

储备培养基的制备

先将琼脂加至900ml蒸馏水，加热溶解，然后加入磷酸氢二钾及蛋白胨，混匀使之溶解，再以蒸馏水补足至1000ml，调整PH为7.2~7.4。趁热用脱脂棉或绒布过滤，再加入乳糖，混匀后定量分装于烧瓶内，置高压蒸汽灭菌器内以115℃灭菌20min，贮存于冷暗处备用。

制法

将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正PH，分装于烧瓶内，121℃高压灭菌15min备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，冷至50～55℃，加入伊红和美蓝溶液，摇匀，倾注平板。