仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯

求助:MDQ毛细管电泳电流前十分钟电流不稳定。但是十分钟后就平缓了。是怎么回事儿?

毛细管电泳(CE)

  • 年前做实验一直是好好的

    但是年后回来就出现了这个问题

    在做之前我拿甲醇,Hcl,NaOH又重新再生过一次。然后昨天和今天做了四次实验。都是电流在前十分钟呈跳跃式阶梯式上升。然后大约十分钟后电流就稳定了。这到底是怎么回事儿啊?做了四次电流的规律都是这个样子啊。

    而且如果只是单纯的在两级加电压。电流不会这样上升。会在很短的时间内上升到正常电流。

    好苦恼啊。

    求大神解答啊。

    然后会在十分钟那块会有吸收峰。样品的吸收峰预计应该是在五十分钟左右才会出啊。
  • 该帖子已被版主-wy20071722加5积分,加2经验;加分理由:鼓励发帖
    +关注 私聊
  • nini2006

    第1楼2014/02/21

    很正常,样品区和缓冲溶液区的溶液性质不一样,电导率不同,需要有一段时间去平衡。前面的峰是溶剂峰,也是很常见,只要不影响分离,不必介怀。

0
  • 该帖子已被版主-wy20071722加3积分,加2经验;加分理由:应助
    +关注 私聊
  • 瀛台寂

    第2楼2014/02/21

    但是会在电流将要恢复正常的时候有吸收峰。这个正常嘛?做了几次都是这个样子呀。

    nini2006(nini2006) 发表:很正常,样品区和缓冲溶液区的溶液性质不一样,电导率不同,需要有一段时间去平衡。前面的峰是溶剂峰,也是很常见,只要不影响分离,不必介怀。

0
    +关注 私聊
  • CEcret

    第3楼2014/02/21

    1.柱活化不用HCl,因为对处理硅羟基没帮助。只用NaOH,然后水,然后buffer.
    2.buffer冲洗时间要足够长,如果你的毛细管在水冲洗以后用buffer冲洗不够,就会出现电流上升的情况。

1
  • 该帖子已被版主-wy20071722加3积分,加2经验;加分理由:应助
    +关注 私聊
  • wy20071722

    第4楼2014/02/21

    建议:

    1.使用的溶液过滤一下

    2.毛细管活化充分

    3.仪器预热的时间长一点

    瀛台寂(v2772193) 发表:年前做实验一直是好好的

    但是年后回来就出现了这个问题

    在做之前我拿甲醇,Hcl,NaOH又重新再生过一次。然后昨天和今天做了四次实验。都是电流在前十分钟呈跳跃式阶梯式上升。然后大约十分钟后电流就稳定了。这到底是怎么回事儿啊?做了四次电流的规律都是这个样子啊。

    而且如果只是单纯的在两级加电压。电流不会这样上升。会在很短的时间内上升到正常电流。

    好苦恼啊。

    求大神解答啊。

    然后会在十分钟那块会有吸收峰。样品的吸收峰预计应该是在五十分钟左右才会出啊。

0
  • 该帖子已被版主-nini2006加3积分,加2经验;加分理由:应助
    +关注 私聊
  • beyond1977

    第5楼2014/02/26

    应助达人

    应该就是nini斑竹说的那样

0
    +关注 私聊
  • ericwong

    第6楼2014/02/27

    赞同第二条。进样品之前,一定要用buffer长时间冲洗,尤其是PBS,绝对不能冲洗20分钟就完事。

    CEcret(v2812644) 发表:1.柱活化不用HCl,因为对处理硅羟基没帮助。只用NaOH,然后水,然后buffer.
    2.buffer冲洗时间要足够长,如果你的毛细管在水冲洗以后用buffer冲洗不够,就会出现电流上升的情况。

0
  • 该帖子已被版主-nini2006加3积分,加2经验;加分理由:应助
    +关注 私聊
  • 瀛台寂

    第7楼2014/02/28

    同志们。正解来了。
    我给贝克曼的技术经理发了封邮件。她说有可能是进样量太大了。进样量如果超过了毛细管的百分之一可能会出现这种情况。
    然后我就把进样量减低了些。这个情况就消失了。
    可能我在开始的时候没有把我的实验条件说的太明白。我使用是非涂层的毛细管。做的实验室利用α-萘胺衍生法分离葡萄糖和果糖。用的缓冲液是ph=9.7的75mmol/l的硼砂缓冲液(没有脱气,但是以前做的时候都是正常的)。分离条件是8kv,正常电流会达到65~70mA。进样条件是5.0psi,8s。
    谢谢大家了。

1
  • 该帖子已被版主-nini2006加3积分,加2经验;加分理由:谢谢跟进和反馈
    +关注 私聊
  • 瀛台寂

    第8楼2014/02/28

    二十分钟?我从来都没有冲洗过那么长时间啊。我一般就是缓冲5~7分钟就完事儿了。

    最经做实验分离葡萄糖和果糖时,会出来三条吸收峰。然后我就单独分离了下葡萄糖和果糖。果糖是正常的,但是葡萄糖会出来两条峰。

    最近很愁这个情况。

    有人说可能是在衍生的时候出现了葡萄糖的同分异构体。也说缓冲液的ph值可能会有影响。这个缓冲时间会有影响吗。

    个人觉得出现葡萄糖的同分异构体的可能性比较大。但是不知道怎么去验证这个结果啊。

    ericwong(ericwong) 发表:赞同第二条。进样品之前,一定要用buffer长时间冲洗,尤其是PBS,绝对不能冲洗20分钟就完事。

0
    +关注 私聊
  • nini2006

    第9楼2014/02/28

    是标准品做的吗?其实只要分得好,随便选一个来做定量,另外一个就以副产物处理就好了。如果想考察它的结构就打一下质谱,有CE-MS最好,没有的话就LC-MS

    瀛台寂(v2772193) 发表:二十分钟?我从来都没有冲洗过那么长时间啊。我一般就是缓冲5~7分钟就完事儿了。

    最经做实验分离葡萄糖和果糖时,会出来三条吸收峰。然后我就单独分离了下葡萄糖和果糖。果糖是正常的,但是葡萄糖会出来两条峰。

    最近很愁这个情况。

    有人说可能是在衍生的时候出现了葡萄糖的同分异构体。也说缓冲液的ph值可能会有影响。这个缓冲时间会有影响吗。

    个人觉得出现葡萄糖的同分异构体的可能性比较大。但是不知道怎么去验证这个结果啊。

0
    +关注 私聊
  • ericwong

    第10楼2014/03/03

    对毛细管进行活化的时候,如果缓冲液没有进行长时间的平衡,会出很多的问题。
    活化的时候只用缓冲液冲洗20分钟,我都是觉得时间太短。

    瀛台寂(v2772193) 发表:二十分钟?我从来都没有冲洗过那么长时间啊。我一般就是缓冲5~7分钟就完事儿了。

    最经做实验分离葡萄糖和果糖时,会出来三条吸收峰。然后我就单独分离了下葡萄糖和果糖。果糖是正常的,但是葡萄糖会出来两条峰。

    最近很愁这个情况。

    有人说可能是在衍生的时候出现了葡萄糖的同分异构体。也说缓冲液的ph值可能会有影响。这个缓冲时间会有影响吗。

    个人觉得出现葡萄糖的同分异构体的可能性比较大。但是不知道怎么去验证这个结果啊。

0
查看更多
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...