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少于定量环的进样量应该如何进样?

液相色谱(LC)

  • 7725i标配的定量环是20uL,药典中经常会遇见进样量为10uL的情况,作为分析应用人员,应该如何操作呢?

    1、最佳的方法当然是舍得投资,购买市场价500~600RMB左右一只10uL定量环,更换到7725i上。 So easy!

    2、领导不批钱。那你有没有液相用的Peek管或者不锈钢管,根据内径,计算一下10uL体积大概需要多长,然后自己发扬DIY精神,空心螺钉、密封子、、peek接头不能少。

    3、DIY能力欠缺,那就学会少于定量环环体积的进样。 下面详细介绍第三种方式。
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  • chphei

    第1楼2014/03/06

    首先来小结一下7725i进样阀的工作原理

    1、进样阀在“Load”状态,定量环未接入管路



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  • chphei

    第2楼2014/03/06

    2、 进样阀在“Load”状态,进样针打入分析样品到定量环。(1)满环进样=定量环体积,一般取2~3倍定量环体积进样。 2)少于定量环体积进样 (需保证之前流动相充满定量环)。




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  • chphei

    第3楼2014/03/06

    3、 进样阀扳动到在“Inject”状态,分析样品被打入色谱柱,定量环充满流动相。


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  • chphei

    第4楼2014/03/06

    有了上述图例说明,下面的方法就好理解了。

    1、如果是满环进样。 一般定量针吸取40~50uL分析样品全部打入进样阀(注意不要打入气泡)

    2、如果需少于定量环体积,如半环进样10uL。首先将进样阀扳动到“Inject”状态,使定量环先充满流动相,然后扳动进样阀到“Load”状态,打入10uL分析样品,再次扳动进样阀到“Inject”状态,实现一次10uL样品进样分析过程。

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  • 老多_小多

    第5楼2014/03/06

    不满环进样品,重现性要差一些

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  • chphei

    第6楼2014/03/06

    10uL比20uL的色谱图的理论塔板数高,这也是药典为何喜欢多采取10uL进样量的原因。 药典对重复性和理论塔板数的重复性都没有什么过高要求。

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  • hnteng

    第7楼2014/03/06

      对于此贴指出两点:

    一、关于7725i的结构图或结构示意图,楼主从网上找来的这个是错误的。液体是直接进定量环,没有经过那个凹槽。这个已经在贴子详细讨论过了。

    二、其实部分充满法进样很简单,就是手要准。

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  • picard

    第8楼2014/03/06

    如果你有PEEK管路,也可以自己剪一小段,当做定量环。

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  • liwei_11520

    第9楼2014/03/06

    懒得DIY定量环 直接用10微升的针打一针进去 我打了4000多针 从来没有出过问题

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  • 雨木霖

    第10楼2014/03/06

    有没有算过这样做的RSD是多少?

    liwei_11520(liwei_11520) 发表:懒得DIY定量环 直接用10微升的针打一针进去 我打了4000多针 从来没有出过问题

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