做土壤微生物的PLFA测定时，内标问题？（急）

应助达人

请问样品处理后溶剂是什么？十九烷酸甲酯在许多有机溶剂里面都可以溶解，最好和样品的溶剂一致或接近。

我的PLFA提取、甲酯化、测定与分析步骤

PLFA提取具体步骤如下：
①    将采回的新鲜土壤4g加入到含20ml 0.2mol/L的KOH甲醇溶液的50ml离心管中，振荡混合均匀。
②    将其在37℃温育1h（脂肪酸释放，并甲酯化，样品10min振荡一次）
③    在其加入3ml 1.0mol/L醋酸溶液中和pH值，充分摇匀。
④    再加入10ml正己烷。使PLFA转到有机相
⑤    再将其600~1000 r/min离心15分钟后，将上层正己烷转到干净试管中，N2气流下挥发掉溶剂。
⑥    再将PLFA溶解在1ml体积比为1:1的正己烷：甲基丁基醚溶液中，充分溶解3~5分钟，—20℃保存，作GC-MS分析。

这样的话，我的溶剂是什么呢

我的PLFA提取、甲酯化、测定与分析步骤

PLFA提取具体步骤如下：
① 将采回的新鲜土壤4g加入到含20ml 0.2mol/L的KOH甲醇溶液的50ml离心管中，振荡混合均匀。
② 将其在37℃温育1h（脂肪酸释放，并甲酯化，样品10min振荡一次）
③ 在其加入3ml 1.0mol/L醋酸溶液中和pH值，充分摇匀。
④ 再加入10ml正己烷。使PLFA转到有机相
⑤ 再将其600~1000 r/min离心15分钟后，将上层正己烷转到干净试管中，N2气流下挥发掉溶剂。
⑥ 再将PLFA溶解在1ml体积比为1:1的正己烷：甲基丁基醚溶液中，充分溶解3~5分钟，—20℃保存，作GC-MS分析。

这样的话，我的溶剂是什么呢?

应助达人

可以考虑用甲基丁基醚溶解十九烷酸甲酯（先少量试一下溶解性，应该无什么问题，但不知道有无其它要求）。