保留时间有问题

可能系统中有气泡或哪部分有轻微堵塞。

保留时间差个5%都还算正常，环境温湿度有没有控制好，柱温有没有控制好。至于压力问题是不是色谱柱没冲干净，导致压力逐渐降低，或者流动相或样品问题导致压力逐渐升高。

堵塞、漏液、气泡都有可能。

应助达人

如果系统中有气泡的话，测试过程中压力应该会有波动的吧，从谱图上看，只是每次进样系统间压力有20-30psi的差异~~~

这倒是。所以不知道楼主是用的单通道还是多通道，多通道的话比例阀有可能有问题。waters的具体结构我不太清楚，以前我使用agilent也碰到过类似情况，原因是泵内的密封圈磨损，流动相发生漏液，漏到seal wash瓶中。

温度不稳定，或者色谱柱没有平衡好！

应助达人

我们用的是多通道的，50%有机相 + 50%缓冲盐。等度测试

应助达人

温度就不知道了，实验室里温度变化不大的，柱温箱和样品室都有控温。

对了，期间有这样一个操作步骤：系统平衡后很长时间没有走样品，我把流速从 1.0 ml/min 降低到 0.1 ml/min 节省缓冲盐。样品来了后再调回来，我们用的是等比例的流动相，不用梯度测试，这个步骤对色谱柱的平衡状态有影响吗~~

应助达人

差一下有没有漏液的情况，比例阀有问题和漏液都会出现压力波动的情况