15 米柱检测邻苯二甲酸酯的方法优化

原天

2014/08/09

私聊

气质联用（GCMS）

0．前言

现实工作中，由于检测项目较多，设备配套跟不上，难免一机多用的情况。最近对于某一方法的优化时，发现优化中有一些论坛网上经常遇上的方法情况，就写出来和大家分享下这次的优化的问题。

1．目的

利用做多溴联苯的柱子，进行邻苯二甲酸酯的检测过程中，发现DBP灵敏度低拖峰严重造成峰型难看，现进行方法优化处理，提高灵敏度、改善峰型，并保证稳定性满足要求。

2．设备试剂

a. PE Clarus 500
b. PE Elite-5HT 15m*0.25mm*0.1um（正常做邻苯用Hp-5ms 30m*0.25mm*0.25um等柱子）
c. 不分流衬管
d. 甲苯（HPLC级）

3．优化难点

1) 柱短、膜薄：柱效比相适应的柱子低太多，富集效低偏点，从下图DBP的峰型就能看出。

2) 试剂甲苯：甲苯沸点相对较高，易对DBP富集造成影响，影响基线。

注：一机多用，所以不会经常换柱子，一次萃取多种检测（多溴，多环，邻苯，四溴，十二烷……）所以样品试剂不会换

4．优化分析

1）未优化前的邻苯谱图

升温程序：110（2min）以20/min升到300（5min）

进样量：1uL

进样方式：不分流进样，0.8min后吹扫

载气流速：1.2ml/min

从图上，我们就可以看到，DBP及BBP拖峰，峰高偏低

对于这种情况，我个人认为是富集不够，所以第一次优化，就是准备降低初始温度开始

1）第一次优化

升温程序：60（2min）以20/min升到300（5min）

进样量：1uL

进样方式：不分流进样，0.8min后吹扫

载气流速：1.2ml/min

同鞋们可以留意下上面的命名编号，因为只挑了几张图，有些方法都是在微调，从中也可以知道我优化多少次，毕竟有时候不可能几次就到位。（本来命名是6PTTT开始的，不过6PTTT的那个因没改序号，跑了空白去了）

降低了初始温度后，会出现一个很多同鞋经常会问的一个情况，同一个物质分成两个峰了，

对于这种情况，我个人仍认为是富集不好，吸附力不足，造成气化后进入柱子的物质，有小部分先跑一段距离，后面大部分在升程加温后，依然追不上先跑的，造成分成两个峰。对于这，我下面的优化就是加长初始温度的保留时间，同时降低升温速度

2）第二次优化

升温程序：60（4min）以15/min升到300（5min）

进样量：1uL

进样方式：不分流进样，0.8min后吹扫

载气流速：1.2ml/min

从这图发现，只是出峰时间推后了，依然是分成两个峰，觉得加长保留时间和减小升温速度不行，结合原来的升温程度和速度，我下面的优化是在稍微增大初始温度和加快升温速度（其实就是觉得慢的不行，就来快的）

3）第4~9次优化

升温程序：80（4min）以25/min升到300（5min）

进样量：1uL

进样方式：不分流进样，0.8min后吹扫

载气流速：1.2ml/min

上图是在初始温度和升温程序经过多次调试后的谱图，使用的阶程式升温主要也是让柱温在DBP沸点之前有一段时候的停留，但最后还是以前面给出的升温程序跑出的图谱相对好些（第五次优化），经过这几次的优化，发现改变温和升程效果不明显，所以下面的优化就是试下改变载气流速（想法是减小流速对吸附性差的柱子，能增加组分的富集，不会造成拖尾严重）

4）第13次符合要求的优化

升温程序：80（2min）以25/min升到300（5min）

进样量：1uL

进样方式：不分流进样，0.8min后吹扫

载气流速：0.6ml/min

后面的优化就是让流速从1.2、1.0、0.8调到0.6mL/min,同时在0.6mL/min把4）的初始温度的保留时间改为2min,就得到上面的图谱。上面的图谱，基本上符合要求，但依然存在小问题。

5．方法验证

1）曲线线性：以1、2、5、10、20mg/L的标液做曲线，线性均R >0.995（DBP为0.9962）----符合要求

2）重复性：以5mg/L的标液进行7次测试，RSD均<2.5%(DBP为2.48%)-----符合要求（5%）

3）稳定性：以5mg/L的标液12小时内进行7次测试（要下班，所以也只能做到12小时，每2小时跑一次，其间有跑样品）RSD值<7%---------符合要求（10%）

4）保留时间偏移：重复性数据显示最大偏移为0.05min，稳定性数据最大偏移0.0 3min-----有点大，凑合用

6．结论

与刚开始优化相比，灵敏度基本大了5倍，方法的线性、重复性与稳定性都附合要求。

但保留时间，是这个方法的最大问题。15m的柱子，流量控制在0.6mL/min,本来就难，而且我的机子不像安的那样是EPC控制，是比较老的PCM流量控制器，所以总体上说，这方法基本满足要求。

7．附表

附表是我个人的一些方法优化的经验，可能是不是很准确（就如这次流量的控制起了大作用），大家参考一下就好，也别太在意，觉得不对就指正。

----	柱子类型	升温程序	进样方式	进样口温度	载气流速	进样量	基体溶剂	衬管选择	MS设置（如频率，驻留时间，离子数量）
改善效果	强	强	中	弱	中	中	弱	中	弱
可操作性	一般	易	一般	易	易	一般	难	一般	易
优势	换根合适的柱子，基本都能达到合适的优化效果	大部分情况可以通过调节升温程序来进行优化	改变进样方式，可以调节进柱浓度，有利于优化	适应的进样口温度，能减小干扰和污染	设置容易	与进样方式一致	溶剂对低沸点物质的强度，拖峰有一定影响	-	对灵敏度、分辨率和质谱碎片基底的调节
劣势	柱子一般较贵，类型又多，并不是所有实验室都能配套，同时一机多用是常态，常换柱是困难的	-	要更换相配应的衬管，在一机多用的情况下，更显灵活性不足	对于低气化点或单一成份，效果明显，但对于混合检测，可操作性不强	可操作范围较小，正常情况下，效果不明显	较大进样量，易造成柱衬管易脏，还容易造成推杆易折	溶剂涉及方法，改变会造成偏离	-	GC分离不好，也起不到什么作用