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β-胡萝卜素测定 仪器不稳定的情况

液相色谱(LC)

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  • 各位早上好
    首先说明的是我之前接触过液相色谱比较少。现在做了一个螺旋藻的β胡萝卜素的测定,发现做的6个平行样其RSD为
    2.9%(含量约为为800mg/100g),但是取最大值和最小的相对误差会达到8%,我们实验室要求是达到5%。所以算出来是不合格,我用单个样品重复测定六次,其RSD和相对误差结果跟六个平行样差不多。所以觉得仪器稳定性有待加强。因为接触的比较少,所以不知道改变哪些参数可以提高稳定性,用的流动相为甲醇乙腈=7:3。用同样的仪器测其他项目稳定性比较好,所以硬件应该没问题,各位液相高手,帮帮小弟出出注意。

    先向各位致谢!!

    各位大神,上传了一些图谱,这些都已经是从十针以后做的了,请各位帮忙分析。谢谢

    顺便附上仪器硬件:色谱柱:Inertsil ODS 4.0*75mm 3um


    检测器:VWD

    谱图如下:




    7-12中的数据整理如下




    楼主所传“数据”文件的数据如下:



夏天的雪 2014/10/21

[quote]原文由 [b]瓜西西(v2715441)[/b] 发表: [quote]原文由 [b]夏天的雪(bingwang228)[/b] 发表: [quote]原文由 [b]瓜西西(v2715441)[/b] 发表: [quote]原文由 [b]夏天的雪(bingwang228)[/b] 发表: [quote]原文由 [b]瓜西西(v2715441)[/b] 发表: [quote]bingwang228:[quote]原文由 [b]瓜西西(v2715441)[/b] 发表:[quote]原文由 [b]夏天的雪(bingwang228)[/b] 发表:[quote]原文由 [b]瓜西西(v2715441)[/b] 发表:[quote]原文由 [b]夏天的雪(bingwang228)[/b] 发表:[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]的第一针前一两针进样可以忽略,有时色谱柱平衡不好,前两针的峰面积会偏差比较大,从而影响整个的RSD;还有,连续进样的色谱峰面积变化有无特点,是规律性变化还是无规则变化,如果是规律性变化可以考虑哪边被污染,进样系统问题,或者样品溶剂挥发等,如果是无规律性变化,再看基线好不好,附近有无干扰,这是需要调整样品前处理方法和色谱方法[/quote]平行样差异不是很大的,六平行样RSD为2.9%,只是最大的一个值和最小的一个值相对误差为8%[/quote]最大值和最小值是否包含在前两针里面,如果在,可以不计算在内的。可以将数据和谱图帖出来,方便分析[/quote] 不能上传图谱,能不能发您邮箱,帮我分析一下?[/quote]可以发附件,帮您编辑上去[/quote]已上传,请大神帮忙分析,多谢啦[/quote]看了您传的谱图,谱图中的保留时间变化也比较大,从11.192变化到11.251,有点异常,需要检查仪器或实验方法[/quote]仪器应该从哪些方面入手呢?谢谢您的解答[/quote]您这7-12的数据是平行样品处理后检测数据,则样品前处理有问题,尤其谱图12中样品,峰面积相差很大;如果是同一样品瓶重复进样,需要检测柱温或者室温影响,泵、流动相脱气[/quote]首先非常感谢您能耐心解答我这菜鸟的问题哈,我还想问一下,我们前处理只是把样品磨碎(测的样品是片剂的保健品),然后用甲醇:乙腈=7:3超声提取15min,离心过滤就直接上机了。这些步骤那些地方比较容易出问题?避光等环境措施会对前处理有较大影响吗?[/quote]超声温度,粉末的均匀度可能会影响到提取结果,尝试延长超声提取时间

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  • wslmpol

    第1楼2014/10/13

    5%的要求挺高的。用同样的仪器测其他项目稳定性比较好,所以硬件应该没问题,那会不会是β胡萝卜素不稳定导致你平行度不好呢?

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  • liwei_11520

    第2楼2014/10/13

    仪器的稳定性,由同一个样品连续进样多次反应; 你的情况,是平行样相差过多,主要因素应该在于前处理阶段。

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  • liwei_11520

    第3楼2014/10/13

    同一样品也出现RSD过大的情况 考虑你的色谱条件是否合理 干扰 等因素

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  • wslmpol

    第4楼2014/10/13

    你的样品是固体还是液体?固体样品很可能存在分布不均匀的问题

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  • 瓜西西

    第5楼2014/10/13

    同一样品重复测定也会出现相对误差大的情况呀

    wslmpol(wslmpol) 发表:5%的要求挺高的。用同样的仪器测其他项目稳定性比较好,所以硬件应该没问题,那会不会是β胡萝卜素不稳定导致你平行度不好呢?

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  • 瓜西西

    第6楼2014/10/13

    我平行样重复6次和单个样品重复测六次结果的RSD都是3%左右,两种情况相对误差都为8%,所以怀疑是仪器稳定性的问题。

    liwei_11520(liwei_11520) 发表:仪器的稳定性,由同一个样品连续进样多次反应; 你的情况,是平行样相差过多,主要因素应该在于前处理阶段。

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  • 瓜西西

    第7楼2014/10/13

    不是RSD,RSD小于3%,但是相对误差超过5%了。

    还有你说的这些因素能否具体一些,本人是新手,希望能详细解答,多谢

    liwei_11520(liwei_11520) 发表:同一样品也出现RSD过大的情况 考虑你的色谱条件是否合理 干扰 等因素

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  • 瓜西西

    第8楼2014/10/13

    方法和样品的原因我都排除了,主要是仪器我不太懂,所以问一下各位大神。正如一楼所说我们的要求比较高{相对误差<5%(不是RSD)},所以需要优化仪器条件

    wslmpol(wslmpol) 发表:你的样品是固体还是液体?固体样品很可能存在分布不均匀的问题

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  • yzulcl

    第9楼2014/10/13

    应助达人

    既然确定是仪器本身(仪器方法)的问题,就把仪器的硬件写出来,色谱方法参数写出来,必要的时候上色谱图,大家看看,也许能看出来问题所在。

    空对空的讨论于事无补。

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  • GF9527

    第10楼2014/10/14

    你是直接用峰面积计算的还是用定量后的结果计算的。如果定量曲线线性

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