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液相色谱图分叉峰原因探讨

液相色谱(LC)

  • 流动相:甲醇-0.02M乙酸铵:5-95
    色谱柱:C18柱250*4.6mm。5um
    流速:1ml/min
    分析肉糜中山梨酸和苯甲酸,单针走了一针混标的时候还挺好的,峰形很好,就又试了一针样品,峰也很好。
    走序列出现问题了,空白溶剂没问题,走混标主峰严重分叉,费解,求原因及分析。
    柱子是新柱子,用过保存在纯甲醇中,使用前过渡了。


    求各位老师帮忙分析,
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  • 三人行

    第1楼2014/10/23

    色谱柱柱头填料塌陷或污染。

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  • 夏天的雪

    第2楼2014/10/24

    应助达人

    新柱子可以联系厂家,可能色谱柱有问题

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  • 浪淘沙隐

    第3楼2014/10/24

    这个很简单,就是因为楼主样品中物质很复杂,肯定还含有一些小极性物质,而流动相又只含有5%的甲醇,这样这些小极性的杂质没有被洗脱出来,而聚集在柱头,影响下一阵的分析。
    解决办法就是采用梯度方法,待待测物出峰后,即增加有机相比例,直到没有杂峰出来,再进下一阵。

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  • hujiangtao

    第4楼2014/10/24

    应助达人

    平衡时间长一些试试

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  • bless_99

    第5楼2014/10/24

    3楼说得比较具体,建议每次做复杂完样品后,梯度洗一下。这样才不会影响下一针。
    或者还可以延长点方法的时间,修约下方法。

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  • 老多_小多

    第6楼2014/10/24

    支持这个观点,还有你可以考虑改进样品处理方法

    浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:这个很简单,就是因为楼主样品中物质很复杂,肯定还含有一些小极性物质,而流动相又只含有5%的甲醇,这样这些小极性的杂质没有被洗脱出来,而聚集在柱头,影响下一阵的分析。
    解决办法就是采用梯度方法,待待测物出峰后,即增加有机相比例,直到没有杂峰出来,再进下一阵。

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  • xy_s

    第7楼2014/10/24

    谢谢大家。今天换了个新柱子就没再出现这种情况。
    我会把昨天出问题那个柱子梯度冲洗的
    我就是很奇怪,那根柱子没做过2次,
    且之前我们保存柱子都是很严谨的,梯度冲洗到纯甲醇,
    使用前也是梯度过渡到流动相比例的水和有机相。
    该柱子是waters的Xbridge长柱,也算是比较好的柱子了。

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  • xy_s

    第8楼2014/10/24

    本人知识尚浅,不太擅长改方法啊哈哈

    老多_小多(emoc98311) 发表:支持这个观点,还有你可以考虑改进样品处理方法

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  • 小虾米

    第9楼2014/10/28

    bingwang228说的很有可能

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  • nixiaolong

    第10楼2014/10/29

    应该是柱子的问题

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