说说白头翁检测那些事

通过白头翁检测说事

该药材为毛莨科植物白头翁干燥根。其外表皮呈黄棕色或棕褐色，根头部有不规则纵皱纹或纵沟，近根头部有白色绒毛，故而得名。主要药用成分为白头翁素、白头翁皂苷等。该药材具有清热解毒，凉血止痢，镇静镇痛,抗真菌之功效，还可用于治疗肝癌等疑难病症。通过它的药理作用和药名我们也可以想到伟大的国际医师白求恩大夫。

下面我们就介绍下高效液相色谱法检测白头翁药材中白头翁皂苷B4含量的内容吧。

实验

原理

精密称取适量粉末样品，加甲醇溶解并超声提取，经进样器进入高效液相色谱系统，经色谱柱分离，紫外检测器检测，保留时间定性，峰面积定量计算（外标法）。

仪器及试剂

仪器：高效液相色谱仪（紫外检测器+等度泵+柱温箱），溶剂过滤器，超声波清洗仪，三号筛（药典筛）等。

试剂：甲醇（色谱纯），超纯水等

样品溶液制备

对照品溶液制备：精密称取5.0mg白头翁皂苷B4对照品于50ml容量瓶中，加甲醇至刻度，配制成每0.1mg/ml的白头翁皂苷B4对照品溶液，备用。

供试品溶液制备：取本品适量粉碎后过三号筛（药典筛），精密称取过筛粉末0.2g置于具塞锥形瓶中，加甲醇10ml，密封，超声处理 30分钟，放冷后置于100ml容量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，0.45μm微膜滤过，待测。

色谱条件

检测器：紫外检测器
色谱柱：Promosil C18，4.6 X 250mm，5um色谱柱

检测波长：203nm

流动相：甲醇：水=64：36（V:V)

流速：1.0ml/min

柱温：30℃

进样量：20μl

对照品色谱图：


供试品色谱图：


这个检测结果还不错，峰形很好，分离度也很好，结果肯定很理想。由于对照品和供试品色谱峰前后都没有杂质干扰，这个方法还可以进行适当优化，以缩短检测时间。下面我们就来具体看看吧。

首先改变下流动相，由原来的甲醇：水=64：36（V:V)变为甲醇：水=70：30（V:V)，其它条件不变，看看效果。

对照品色谱图：


供试品色谱图：

接下来改变下色谱柱温度，由原来的30℃改为40℃（为了防止损害色谱柱，色谱柱温度最好不要超过40℃），其它条件不变，看看效果。

对照品色谱图：


供试品色谱图：


通过以上色谱图可以看出以上几种方法检测效果都不错，峰形、分离度都能满足要求，尤其是采用两种方法优化后，检测时间缩短了近2min，色谱峰略变窄、变高，峰形也略好。这样检测时间变短了，检测灵敏度更高了，分析结果更准确了。

结论：该方法检测白头翁药材中白头翁皂苷B4含量方便、快捷、准确、可靠。方法优化后效果更好，以上三种方法均适用于该药材检测（不同样品，方法优化方式可能大不相同，具体情况要具体分析，具体对待）。

当然这个方法优化后所带来的效果并不明显，很多人可能也不愿意采取这种方式，但有些样品检测，采用了这种方法，带来的效果是非常可喜的，希望大家能多尝试、多借鉴这种做法。省时、省力、效果好，何乐不为！