关于头孢类聚合物分析的咨询

还有就是，对照品用含量测定用的对照品可以吗，还是有专门聚合物的？

1、 试验使用平时走C18的液相色谱仪就可以吗？有没有什么区别和需要注意的呢？
这个是不行的，用的葡聚糖G-10或者选择sec-120型或TSK的

2、 药典规定的进样量是100～200μL，而我们的自动进样器最大进样量只有99μL。我们采用99μL进样可以吗，会不会有什么问题？
如果实在没有可以配置到相同的浓度，看试验效果如何再做调整

3、 蓝色葡聚糖2000，有什么使用注意吗？配溶液时，与普通化学试剂有区别吗？进样前过滤膜时会不会被截留而有损失？需不需要回收再利用，还是用完就扔了？如果回收或丢弃需要什么特殊的处理吗？需要分段接收流出液吗，如果需要如何分段和查看时间，又如何处理？还有就是，它就是定位用的是吗，还有别的用处吗？
这个稳定性还是很强的，建议配一瓶后放冰箱，每次拿出来倒一个样品瓶用完扔掉样品瓶的。
就把它当做一般样品使用即可，不用回收，价格也不贵的。

4、 我们买了现成的填料是Sephadex G-10的凝胶柱，使用上有什么注意的？看过一点资料是关于自己填充柱子的，说凝胶用前需要浸泡活化，之后是回收重复利用的。那么现成的柱子有没有什么区别和需要注意的呢，还需要活化吗？还有就是由于买不到叠氮化钠，最后封存柱子怎么处理？由于怕长菌，流动相和封柱子的水需要处理吗？

目前药典规定是G-10来做，活化啥的使说自己装柱子时需要，装好的柱子直接用即可。
保存的话，加点乙醇也可以的，注意最后保存在冰箱里即可
如果是24小时话，纯水也可以的。

5、 药典里的对照品与供试品为什么在不同的流动相中走，对结果有什么影响？流动相水(B)和盐相(A)有先后顺序吗？

按照药典规定要求走，有顺序的

6、 试验的柱温在多少比较合适？

常温即可，你也可以自己控制下，看看对你试验有没更好促进

7、 头孢类物质比较不稳定，由于试验时间可能比较长，我能不能把溶液提前配出来放到自动进样器里？放多久不会影响试验结果？需不需要做什么处理？

是的，这个我还做过试验的，24小时内变化还是有的。但如果仅仅是4小时内，问题不大。当然最好是处理仪器开低温控制样品盘外，最好临时配。


8、 头孢类物质的对照品本身有聚合物的峰吗？标准说以头孢某某计，就是以聚合物的峰面积和该物质的称取量计算的是吧；各种指标如重复性和线性等都是测定聚合物的峰，我的理解对吧。

对的

9、药典里，对照品溶液与供试品溶液的浓度相差很大，为什么？

这个我不记得怎么回事了，你可以查下计算限度的方法，就能推断了

对照品用含量测定用的对照品可以吗，还是有专门聚合物的？

就是含量测定的

好久没做实验了，可鞥回复的不够准确或标准，请大家一起讨论！

另外，如果用该柱子做不好，或满足不了药典标准，也不用担心，这个很正常。
除了柱子本身效果外，该方法也在改进，你可以查询下。
有啥问题，我们可以继续沟通

谢谢小卢，等消息等的好急迫。真的非常谢谢，回答的很耐心。

还想问一下，你说用乙醇保存也可以，那比例多少合适呢？
进样需要低温进样吗？没有低温设备放冰箱可以吗？进样前用恢复到室温吗？

乙醇保存的话，其实也是没办法的，滴几滴就算了，因为有机溶剂对填料时有破坏的；如果叠氮化钠不好买，就用低浓度的氢氧化钠保存吧，或者纯水

无需低温进样的，低温的目的保存样品不降解，所以如果仪器没有控温装置，你就进样前再稀释样品即可

先走水相，然后走流动相