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液相色谱柱可以用甲酸冲洗吗？

液相色谱（LC）

  • 小弟最近在做食品项目的开发，不小心把一些怀疑是蛋白质的杂质冲进色谱柱了，峰型变差好多。有同事建议用0.1%甲酸水（pH≈3）冲洗后再用乙腈冲洗。小弟不敢贸然采纳，想请求各位大侠意见：
    1、一般xdb C18色谱柱使用pH范围在2~8，pH=3时柱流失会不会很大？
    2、蛋白质应该使用什么溶剂冲洗？我的猜想是用较高比例的水：乙腈，50℃冲洗，后再用纯乙腈冲洗。不知是否可行
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  • 该帖子已被版主-夏天的雪加2积分，加2经验;加分理由:鼓励发帖
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  • 浪淘沙隐

    第1楼2015/06/09

    不同的蛋白石不是有不同的等电点吗？流动相应该要在远离等电点的pH范围内吧，不然蛋白石析出来堵塞色谱柱就麻烦了。
    另外C18色谱柱使用pH3的流动相完全没问题的，就是使用0.1%的甲酸（pH估计不超过2）也是没什么问题的。

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  • 夏天的雪

    第2楼2015/06/09

    应助达人

    pH在3时在色谱柱的耐受范围内，可以进行冲洗，冲洗之前可以测定一下0.1%的甲酸的pH

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  • hujiangtao

    第3楼2015/06/09

    应助达人

    质谱上一般都要求进0.1%甲酸的

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  • 老多_小多

    第4楼2015/06/09

    0.1%甲酸可以，就是不一定有效果

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  • tozan

    第5楼2015/06/09

    之前没有考虑到等电点问题，学到了

    浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:不同的蛋白石不是有不同的等电点吗？流动相应该要在远离等电点的pH范围内吧，不然蛋白石析出来堵塞色谱柱就麻烦了。
    另外C18色谱柱使用pH3的流动相完全没问题的，就是使用0.1%的甲酸（pH估计不超过2）也是没什么问题的。

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  • tozan

    第6楼2015/06/09

    非常感谢各位大侠。

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