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测定食品中的DHA(二十二碳六烯酸)和EPA(二十碳五烯酸)
gbw114com
2015/08/01
私聊
食品常规理化分析
一、案例
近年来,被消费者争先购买的“深海鱼油”之类的营养品,其标签上往往可看到“DHA”和“EPA”这两类成分,DHA为二十二碳六烯酸,EPA为二十碳五烯酸,均属于多不饱和脂肪酸,深海鱼油中DHA和EPA含量较高。EPA和DHA能促进神经系统的发育,乳粉中加入EPA可抑制脂质在小肠的吸收和胆汁酸的吸收,抑制肝脏脂质和脂蛋白合成,促进胆固醇排泄,降低血液中的甘油三酯、VLDL、LDL和胆固醇含量,同时增高有益的HDL含量,有效防止高脂血症的发生,并可抑制血小板凝聚,减少血栓的形成,DHA和EPA还可以有效增强记忆力,预防老年性痴呆,延缓衰老,改善视力。
二、选用的国家标准
GB/T 5009.168--2003食品中二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的测定——
气相色谱
法。
三、测定方法
1.皂化
取鱼油制品或经过处理的鱼油脂lg于50mL具塞容量瓶中,加入10mL正己烷轻摇使之溶解,并定容,然后吸取1.00~5.OOmL于另一10mL具塞比色管中,再加入2mol/L氢氧化钠一甲醇溶液lmL,振荡lOmin,置于60~C水浴中加热1~2min,皂化完全后,冷却到室温。
2.甲酯化
将皂化后的样品加入2m01/L盐酸一甲醇溶液2mL,振荡10min,于50℃水浴中加热2min,进行甲酯化,弃去下层液体,再加约2mL蒸馏水洗净并除去水层,用滴管吸出正己烷层,移至另一装有无水硫酸钠的漏斗中脱水,将脱水后的溶液在70℃水浴上加热浓缩,定容至lmL,待上机测试用。
标准溶液系列:准确吸取配制好的标准溶液(此溶液含EPA和DHA各0.50mg/mL)1.0mL、2.0mL、5.0mL分别移入lOmL具塞比色管中,再加入2mol/L盐酸甲醇溶液2mL,充分振荡10min,以下步骤同上处理后,此系列标准溶液中EPA或DHA的浓度依次为0.5mg/mL、1.0mg/mL、2.5mg/mI。待上机测试用。
3.
气相色谱
分析
色谱柱:玻璃柱lm×4mm(id),填充涂有10%DEGS/Chromosorb W DMCS80~100目的载体。
气体及气体流速:氮气50mL/min、氢气70mL/min、空气100mL/min。
系统温度:色谱柱185℃、进样口 210℃、检测器210℃。
4.测定
(1)标准曲线的制作 分别吸取处理后的标准溶液1.0μL,注入色谱仪,测得不同浓度EPA甲酯、DHA甲酯的峰高,以浓度为横坐标,相应峰高响应值为纵坐标,得标准曲线。
(2)测定样液把处理后的样品溶液1.0~5.OμL注入
气相色谱仪
,以保留时间定性,以测得的峰高响应值与标准曲线比较定量。
5.结果计算
X=A*V3*V1/m*V2
式中 X——试样中二十碳五烯酸或二十二碳六烯酸的含量,mg/g;
A——被测定样液中二十碳五烯酸或二十二碳六烯酸的含量,mg/mL;
V
1
一鱼油或海鱼类试样皂化前定容体积,mL;
V
2
——鱼油或海鱼类试样用于皂化样液体积,mL;
V
3
——样液最终定容体积,mL;
m——样品的质量,g。
6.试剂
①正己烷。
②甲醇。
③2mol/L氢氧化钠一甲醇溶液:称取8g氢氧化钠溶于lOOmL甲醇中即可。
④2mol/L。盐酸一甲醇溶液:把浓硫酸小心滴加在约lOOg氧化钠上,把产生的氯化氢气体通入事先量取好的约470mL甲醇中,按质量增加量换算,调制成2mol/L盐酸一甲醇溶液,密封保存在冰箱中。
⑤二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸标准溶液:精密称取EPA、DHA各50.0mg,加入正己烷溶解并定容至100mL,此溶液含EPA和DHA各0.50mg/mL。
7.仪器
①
气相色谱仪
(附有氢火焰离子化检测器)。
②索氏提取器。
③氯化氢发生系统(启谱发生器)。
④刻度试管(带分刻度):2mL、5mL、10mL。
⑤组织捣碎机。
⑥旋涡式振荡混合器。
⑦旋转蒸发仪。
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马踏飞燕(langhuashang)
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