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求助 GPC 保留时间提前

凝胶色谱(GPC)

  • 最近几次用GPC测样品峰分子量时,样品峰保留时间居然比之前提前了1min左右,分子量大了三倍,而作分子量标曲的保留时间与之前测得一样;然后怀疑是样品问题,取了好几个之前测过的样品重新测定,保留时间也比之前提前了1min左右,分子量也增大了许多。后来测试了柱效,柱效也没怎么变。
    请问各位大神,像GPC测定里,是不是会出现特异性的保留时间漂移现象?还望各位多多指点
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  • xiaoxizi

    第1楼2015/08/16

    测试条件什么的都没变,同之前一样。现在头疼,找不着原因

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  • 小不董

    第2楼2015/08/17

    应助达人

    样品也是右旋糖苷吗?和标准样品一样的溶解和保存吗?
    样品有可能聚合,团聚吗?
    流动相的盐等都没变化?有更换流动相没,测下流动相的pH值,是否和一样的一样?
    再就是样品溶液的浓度变大了没

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  • xiaoxizi

    第3楼2015/08/17

    您好 非常感谢您的回复。样品是一复合物 溶解保存方法同作标曲一样;流动相的盐没有变,都是按之前操作做的,pH也同之前一样;样品浓度也没有改变。后来 我们用与复合物相近结构的原料走样,原料保留时间也提前了1min左右,同我们待测复合物一样。

    小不董(doxw0323) 发表:样品也是右旋糖苷吗?和标准样品一样的溶解和保存吗?
    样品有可能聚合,团聚吗?
    流动相的盐等都没变化?有更换流动相没,测下流动相的pH值,是否和一样的一样?
    再就是样品溶液的浓度变大了没

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  • 小不董

    第4楼2015/08/17

    应助达人

    你是分析的糖,是比较难做的,温度影响也很大,又是钠盐,pH值影响也很大。
    也不排除你说的可能性,柱子适合吗?糖柱?流动相一定要正确。
    另你知道样品的理论分子量吗?现在分析出来的保留时间都很稳定?多长时间出现保留时间延后的,是否先在柱子填料达到饱和了?

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  • xiaoxizi

    第5楼2015/08/17

    您好,是之前有好几个月测是保留时间和分子量都正常,从上周开始,最近几次都出现保留时间提前,提前了1min,分子量大了三倍;而作分了量标准曲线右旋糖苷的保留时间都正常。色谱条件像温度、pH等这些也都同之前最初的一样,没有改变过。

    小不董(doxw0323) 发表:你是分析的糖,是比较难做的,温度影响也很大,又是钠盐,pH值影响也很大。
    也不排除你说的可能性,柱子适合吗?糖柱?流动相一定要正确。
    另你知道样品的理论分子量吗?现在分析出来的保留时间都很稳定?多长时间出现保留时间延后的,是否先在柱子填料达到饱和了?

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  • xiaoxizi

    第6楼2015/08/17

    柱子是用的G4000PWXL

    小不董(doxw0323) 发表:你是分析的糖,是比较难做的,温度影响也很大,又是钠盐,pH值影响也很大。
    也不排除你说的可能性,柱子适合吗?糖柱?流动相一定要正确。
    另你知道样品的理论分子量吗?现在分析出来的保留时间都很稳定?多长时间出现保留时间延后的,是否先在柱子填料达到饱和了?

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  • touda_mf

    第7楼2015/09/07

    会不会是你的样品与色谱柱填料是有反应或者吸附的,做的样品多了导致色谱柱污染。以前我也试过出峰时间提前,压力什么的都没变,然后没找出原因,直接换新柱子解决的问题。

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