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牛血清蛋白标准曲线的测定

  • 天空蔚蓝
    2015/08/27
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 各位大神,最近在册牛血清蛋白标准曲线,资料上显示说,牛血清蛋白与考马斯亮蓝结合之后在595 nm处显示最大吸收,可是为什么我用紫外扫谱发现在578 nm处才是最大吸收,但是测出来的不同浓度的吸光度线性关系也不好,排出紫外检测器的问题,到底是什么原因呢????
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  • 一片枫叶

    第1楼2015/08/27

    应助达人

    对于给定的检测器,在规定的检测波长下,物质溶液的吸光度除与吸光物质的摩尔吸光系数有关外,还与其摩尔浓度有关。规定的检测波长必须是吸光物质的紫外吸收截止波长(或大于其截止波长20nm),这时吸光物质的吸光度与吸光物质的摩尔浓度(在线性范围内)才有线性关系。在进样体积一定的情况下,摩尔浓度有一定的范围,低于或高于其范围都不成线性关系。

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  • 老多_小多

    第2楼2015/08/27

    595 nm是不是理论值,试剂不同会发生光移

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  • 天空蔚蓝

    第3楼2015/09/09

    是不是因为配制的考马斯亮蓝溶液没有过滤造成的? 同一个实验室的人他测得的最大吸光度却在596.2 nm处,我们俩用的是同一批考马斯亮蓝溶液。

    老多_小多(emoc98311) 发表:595 nm是不是理论值,试剂不同会发生光移

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