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空梦心

2016/09/20

私聊

液相色谱（LC）

BSA在SRT SEC-150色谱柱上的载量测试
	色谱柱: SRT SEC-150, (5 μm, 7.8x300 mm) 流动相: 150 mM PBS, pH 8.5 流速: 1.0 mL/min 进样体积: 10 μL 检测波长: UV 214 nm

完美的批间重现性
SRT SEC固定相的合成采用可控的表面化学修饰技术，其表面涂层高度重现，使得填料批次与批次之间有着良好的重现性，加之严格的装柱工艺控制，确保了不同批次色谱柱之间的保留时间的差异在5%以内。下图是蛋白标准混合样品在3个不同批次SRT SEC-150柱上分离得到的结果。其中核糖核酸酶A的保留时间差异最大，但也在2%以内。

三个不同批次SRT SEC-150柱之间的对比图谱
色谱柱: SRT SEC-150, (5 μm, 4.6x300 mm) 流动相: 150 mM phosphate buffer, pH 7.0 流速: 0.35 mL/min 检测波长: UV 214 nm 温度: Ambient (～23 ^oC) 进样量: 5 μL 样品: 1) Thyroglobulin (1.0 mg/mL), 2) BSA (1.0 mg/mL), 3) Ribonuclease A (1.0 mg/mL), 4) Uracil (2.5 mg/mL)

优异的稳定性
SRT SEC固定相表面具有一层极致密的亲水、中性聚合物薄膜，可以阻止流动相接触薄膜内侧，防止薄膜脱落，即使在高流速下也能保持高的稳定性。

SRT SEC色谱柱稳定性测试

色谱柱: SRT SEC-300, (5 μm, 7.8x300 mm) 流速: 1.7 mL/min.	流动相: 250 mM NaCl in 100 mM sodium phosphate, pH 7.0. 样品: Monoclonal antibody.

SRT SEC固定相在pH 2.0到8.5之间均具有高的稳定性。下图为成都摩尔科学仪器有限公司提供表明，在用700柱体积的磷酸缓冲液 (pH 8.5)冲洗后，SRT SEC-300的固定相几乎没有改变。
SRT SEC固定相可用于多种缓冲体系，如醋酸铵、磷酸盐、Tris等。当用150 mM的磷酸缓冲液 (pH 7.0)作为流动相时，在45天内进样100次保留时间的偏差在5%以内。SRT SEC固定相可在高盐浓度，如2.0 M下使用。另外，SRT SEC柱在有机溶剂如甲醇、乙醇、THF、DMF、DMSO等中也可使用。

SRT SEC柱pH 8.5条件下稳定性的测试
色谱柱: SRT SEC-300, (5 μm, 4.6x300 mm) 流动相: 150 mM PBS, pH 8.5 流速: 0.35 mL/min. 检测波长: 214 nm 进样量: 3 μL 样品: 1) Thyroglobulin, 2) BSA, 3) Ribonuclease A, 4) Uracil

高蛋白回收率
SRT SEC固定相为中性亲水固定相。蛋白和其他生物分子与SRT柱固定相之间几乎没有非特异性相互作用。蛋白不会吸附到硅胶基质表面，因此SRT色谱柱对蛋白具有高的回收率，且能保持很好的活性。例如，在分离酸性蛋白BSA以及碱性蛋白溶菌酶的过程中样品回收率大于95%。