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液相空白样走梯度基线不好

renzhang86

2016/10/26

液相色谱（LC）

各位老师好，最近刚接触液相色谱，用梯度洗脱进了几针空白（超纯水），跑出的基线起伏很大，出现一些杂峰，重现性不好，也很不好看，基线跑成这样是否正常？怎样改善？
仪器：安捷伦1260，色谱柱：ZORBAX SB C-18 4.6×150mm，5μm，流速：1.2mL/min，柱温：40 ℃.
梯度:
时间min 水% 甲醇%
0 80 20
6 60 40
35 20 80
45 20 80

分
该帖子已被版主-夏天的雪加2积分，加2经验;加分理由:鼓励发帖

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支点

第1楼2016/10/26

应助达人

只走梯度不进超纯水呢？

0

夏天的雪

第2楼2016/10/26

应助达人

可能仪器、色谱柱或者试剂被污染了，用的水是超纯水，甲醇是色谱纯吗？

0

renzhang86

第3楼2016/10/26

甲醇是赛默飞世尔的色谱级甲醇，只是这超纯水是我们单位的超纯水机制的。
夏天的雪(bingwang228) 发表:可能仪器、色谱柱或者试剂被污染了，用的水是超纯水，甲醇是色谱纯吗？

0

夏天的雪

第4楼2016/10/27

应助达人

仪器，特别是色谱柱或者进样器中有残留时会出峰的
renzhang86(renzhang86) 发表: 甲醇是赛默飞世尔的色谱级甲醇，只是这超纯水是我们单位的超纯水机制的。

0

山河永寂

第5楼2016/10/27

色谱柱污染，用1h全梯度进空针清洗色谱柱两次，然后用最初梯度比例进行平衡30min，观察基线变化情况。

0

yifan1117

第6楼2016/10/27

恩，估计色谱柱有点污染了。

0

m3133829

第7楼2016/10/27

我们有时候用Fisher的乙腈会出现一些莫名其妙的杂峰，所以如果冲洗了柱子还是不行可以考虑考虑这方面的问题

0

lijing320323

第8楼2016/10/29

梯度常出现溶剂峰，是正常的
楼主的就要考虑柱子是否干净，仪器是否冲洗干净了

0

flyaway

第9楼2016/10/30

水出问题的可能性大

1

m3046544

第10楼2016/10/31

柱子是不是新的，看下柱子测试时的流动相，是不是反相的，
支点(zhx_fs_ln)发表:只走梯度不进超纯水呢？

0

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