凝胶色谱(GPC)
小不董
第1楼2016/11/07
加缓冲盐后,检测器purge了吗?有溶剂峰吗?另在没有缓冲盐时,你的样品可能不是按照体积排阻来分离的,就一根柱子?4.2min出峰有点早,明显不对了。
徐松
第2楼2016/11/08
加缓冲盐后,检测器purge了。溶剂峰有的,流速1ml/min,保留时间在9.4min左右。纯水流动相谱图:加盐后谱图:差异很大,麻烦版主帮我分析下原因,万分感谢。
第3楼2016/11/08
加了缓冲盐后,基本正常了,但你最好还需要做些试验,一个是你的样品是什么离子型的?pH如何,是否需要调节pH,加什么缓冲盐比较适合,缓冲盐的浓度至少要加到没有第一个图的那种情况。
第4楼2016/11/08
磷酸盐是调节pH的,这个是选择加的, 有的加磷酸二氢钾,有的加磷酸氢二钾,就看你的样品决定的。硝酸钠是比较普遍的缓冲盐,也有人使用醋酸钠。这些盐的选择都是看你的样品的。你可以查查样品测试文献,资料。
第5楼2016/11/09
谢谢版主,我的样品是阴离子型,亲水性,pH值在7-9之间。为什么流动相不加盐,用纯水,我的样品分析时,会出现那样的情况?
第6楼2016/11/09
我的缓冲盐是加了0.1M硝酸钠+0.01M磷酸氢二钠。
第7楼2016/11/09
由于你的的样品是阴离子型,亲水性,pH值在7-9之间。显碱性,在凝胶色谱分离时,需要尽量消除OH(羟基)的化学键作用,所以流动相需要加盐,和pH缓冲盐。在你样品溶解时,也要用含有缓冲盐的流动相来配置溶液。配置样品溶液的浓度在保证信号的前提下也尽量的小,更好。
第8楼2016/11/09
谢谢版主的分析,受教了
北方海盗
第9楼2017/01/20
请加微信交流,zorro_zheng,加时请提示色谱。
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