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流动相影响出峰时间

液相色谱(LC)

  • 流动相为磷酸二氢钠溶液:甲醇:乙腈=50:35:15,加入氯化十六烷三甲胺至最终浓度为0.002mol/L,用磷酸调节ph至3.5。减压抽滤。
    第一天配置好的流动相,目标物质出峰时间为11min。
    第二天继续使用前一天的流动相,目标物质出峰时间为7min。
    这是什么原因?
  • 该帖子已被版主-夏天的雪加2积分,加2经验;加分理由:鼓励发帖
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  • 牛一牛

    第1楼2016/11/23

    应助达人

    最明显的原因:
    有机相挥发
    添加剂不稳定挥发
    流速调整

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  • p3134650

    第2楼2016/11/23

    应助达人

    如果有机相在流动相中挥发了,比例就会相应的减小,那么出峰时间应该是拖后才对吧。

    牛一牛(v2700892) 发表:最明显的原因:
    有机相挥发
    添加剂不稳定挥发
    流速调整

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  • 有水有渝

    第3楼2016/11/23

    应助达人

    你的色谱柱清洗好了吗,另外样品是新配制的吗?

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  • p3134650

    第4楼2016/11/23

    应助达人

    色谱柱每次工作结束都用90:10的水甲醇清洗,然后在用100的甲醇清洗,应该能清洗彻底。
    样品是新配置的。之前也尝试过,样品提取好之后,隔夜上机,与前一天上机没有差别。

    有水有渝(xky0230699) 发表:你的色谱柱清洗好了吗,另外样品是新配制的吗?

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  • 浪淘沙隐

    第5楼2016/11/23

    这个流动相缓冲能力不足,不信测下pH,多半已经不是3.5了。

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  • p3134650

    第6楼2016/11/23

    应助达人

    因为ph的变化,所以目标物质时间改变了呗?

    浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:这个流动相缓冲能力不足,不信测下pH,多半已经不是3.5了。

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  • 夏天的雪

    第7楼2016/11/23

    应助达人

    个人认为也是pH值得影响,另外还有色谱柱是否完全平衡

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  • 浪淘沙隐

    第8楼2016/11/23

    酸性或碱性化合物,其保留容易因流动相pH的变化而变化。中性化合物不会受流动相pH的变化的影响。

    p3134650(p3134650) 发表: 因为ph的变化,所以目标物质时间改变了呗?

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  • p3134650

    第9楼2016/11/24

    应助达人

    明白了,谢谢。看来是流动相的ph不稳定。
    那么为了保证每天出峰时间一致,第二天是不是应该再调节一下ph呢?

    浪淘沙隐(zhoujin83) 发表: 酸性或碱性化合物,其保留容易因流动相pH的变化而变化。中性化合物不会受流动相pH的变化的影响。

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  • p3134650

    第10楼2016/11/24

    应助达人

    嗯,应该是ph的问题。柱子已经至少用流动相跑了1个小时了。

    夏天的雪(bingwang228) 发表:个人认为也是pH值得影响,另外还有色谱柱是否完全平衡

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