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【讨论】CE和CEC中常用的电渗流EOF标记物

  • wanghf0821
    2006/11/20
  • 私聊

毛细管电泳(CE)

  • CE和CEC中常用的电渗流EOF标记物,最常见的应该是硫脲吧?当然还有其它的。大家讨论讨论。另外,还想请教为什么用硫脲?特别是在CEC里,其实硫脲在电色谱柱上除了受电渗流的驱动外,可能也参与色谱分配的过程,用它作为EOF标记很恰当吗?
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  • 芝兰

    第1楼2006/11/20

    我用丙酮比较多,它的结构和硫脲差不多,电渗流标记物的量一般都比较少,我一般用0.5% v/v的浓度。因此它的干扰应该不是很大。

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  • 舒衫游鹭

    第2楼2006/11/20

    恩,其实DMSO也常有人用吧!
    An ideal EOF marker should possess following properties:
    (1) 与组成缓冲液的溶剂分子有相同的淌度(即与EOF淌度相同);
    (2) EOF标记物分子不与样品中的分析物分子存在任何作用力(为避免这种影响,有一种技术叫自标记技术的);
    (3)在检测窗口处,具有不同于缓冲液的响应值(相当于把EOF从“无形”变为“有形”。)

    另外,个人认为CEC中的EOF marker的选择标准应该与MEKC,MEEKC是一样的,因为它们都存在分配作用。因此除了要求标记物淌度与EOF一样之外,还要求“标记物分子的极性与溶剂分子的极性一致”。

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  • wanghf0821

    第3楼2006/11/20

    谢谢答复,但还是有些抽象,能否再联系实际说说?
    我做CEC时常用乙腈加缓冲溶液作为分离介质(流动相),按你所说的标准,该怎么比较EOF标记物和溶剂分子的淌度呢?

    jack2070 发表:恩,其实DMSO也常有人用吧!
    An ideal EOF marker should possess following properties:
    (1) 与组成缓冲液的溶剂分子有相同的淌度(即与EOF淌度相同);
    (2) EOF标记物分子不与样品中的分析物分子存在任何作用力(为避免这种影响,有一种技术叫自标记技术的);
    (3)在检测窗口处,具有不同于缓冲液的响应值(相当于把EOF从“无形”变为“有形”。)

    另外,个人认为CEC中的EOF marker的选择标准应该与MEKC,MEEKC是一样的,因为它们都存在分配作用。因此除了要求标记物淌度与EOF一样之外,还要求“标记物分子的极性与溶剂分子的极性一致”。

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  • wanghf0821

    第4楼2006/11/20

    在分离实验条件(如电压、流动相等)相同的情况下,EOF的大小能反映毛细管或CEC柱子表面的可离子化基团(如Si-OH或-COOH等)数目的多少吗?

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  • 芝兰

    第5楼2006/11/20

    影响EOF的因素很多,你可以从EOF的公式看一下两者是否相关。

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  • 舒衫游鹭

    第6楼2006/11/21

    具体怎么说我觉得真的比较难哦,我不能讲清楚......
    如果你的运行介质是乙腈+水的缓冲液的话,(1)首先水、乙腈分子都是电中性的,那标记物分子应该也是电中性的(其实这是最重要的,满足这一点就基本满足要求了;(2)还要看的固定相的极性(如果是非极性固定相,那么A、你流动相加了乙腈(非极性),会使固定相和流动相的极性趋于接近化,因此标记物分子分配带来的影响会减小;B、非极性固定相,就尽量选择极性大的标记物,因为流动相是水的极性肯定比固定相大,无论是硫脲、丙酮还是DMSO我认为肯定都可以吧,你可以分别试试这三种的出峰时间是否接近或者一样C、多试几种电中性的标记物,出峰时间越短肯定越合适,因为在固定相上的分配只会推迟标记物出峰)。
    我表达能力很差的,很罗嗦......

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  • 舒衫游鹭

    第7楼2006/11/21

    关于表面基团的问题,不知道你说得是同一根管子进行改性前后的问题,还是不同管子的比较。如果是不同的管子,需要考虑的因素叫比较多了,如果是同一根管子,我想应该是可以得出结论的。

    EOF的产生主要就是因为管子内壁有净电荷,因此有两种方式:缓冲液中带电粒子在内壁的吸附及内壁基团的离解。这里有一篇很好的文献,是讨论任何溶剂条件下(水、非水),EOF的产生什么的,你可以看看。
    J. Microcolumn Separations, 11(3):199~208(1999)。
    我网速较慢,就不上传了,对了,题目好像是Characteristics of Electroosmotic Flow in Capillary Electrophoresis in Water and in Organic Solvents without Added Ionic Species。看看这篇文献的第6页吧!

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  • wanghf0821

    第8楼2006/11/21

    谢谢!特别是Jack2070,你很专业呀!

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  • wanghf0821

    第9楼2006/11/21

    我说的是不同的管子,但柱长和内径一样,只是在改性柱子时所用原料的配比有差异而已。我是不是可以认为类似于同一管子?
    Jack2070推荐的文献还没来得及看,谢谢!我会仔细看看!

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  • 啊莲雨天

    第10楼2015/09/26

    好想问问你,现在我也遇到这样的问题,我的样品是用甲醇溶解的,但是每次出来的都是甲醇溶剂峰,我的是安培检测,,我改怎么办,才能检测到样品。。?

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