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液相色谱从使用反相色谱柱到正相色谱柱需要做哪些工作

液相色谱(LC)

  • 之前一直用的C18反相柱,现在因为样品需要,得换成正相柱进行样品分析,请问各位高手,液相色谱从使用反相色谱柱到正相色谱柱需要做哪些工作?
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  • sdlzkw007

    第1楼2016/11/30

    应助达人

    理论上需要按照厂家的说明要求进行部件更换和流动相置换。比如柱塞杆密封圈更换,有的设备厂家规定短时间使用正相可以不用更换。流动相置换一般遵循异丙醇过渡的原则,在使用的流动相中添加一相为异丙醇,并逐渐增加至100%;注意异丙醇粘度较大,尽量选用低流速,密切观察柱压。在100%异丙醇的状态下添加一相正己烷或者其他正相流动相,并逐渐增加至100%。等到系统平衡后可以进行正相色谱分析。避免使用Peek管路和接头。

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  • 有水有渝

    第2楼2016/11/30

    应助达人

    楼主使用正相时的流动相是什么,色谱柱是什么类型的?

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  • 夏天的雪

    第3楼2016/11/30

    应助达人

    论坛里有相关的帖子,可以搜索一下,sdlzkw007老师讲的也比较详细,可以参考的。主要是流动相需要用异丙醇过渡,正相到反相,反相到正相都需要用异丙醇过渡;异丙醇粘度大,需要调低流速;还有密封圈问题

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  • lumalone

    第4楼2016/12/01

    基本操作就如sdlzkw007老师所说。还有一点需要注意的是,安捷伦生产的真空腔是不适合长时间储存正相溶液的,最好用异丙醇过夜。

    sdlzkw007(sdlzkw007) 发表:理论上需要按照厂家的说明要求进行部件更换和流动相置换。比如柱塞杆密封圈更换,有的设备厂家规定短时间使用正相可以不用更换。流动相置换一般遵循异丙醇过渡的原则,在使用的流动相中添加一相为异丙醇,并逐渐增加至100%;注意异丙醇粘度较大,尽量选用低流速,密切观察柱压。在100%异丙醇的状态下添加一相正己烷或者其他正相流动相,并逐渐增加至100%。等到系统平衡后可以进行正相色谱分析。避免使用Peek管路和接头。

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  • lijing320323

    第5楼2016/12/01

    关键是仪器的密封圈等能否耐受正相溶剂

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