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液相色谱柱的平衡

lijing320323

2017/02/09

液相色谱（LC）

高效液相色谱仪的使用过程中，若遇到使用不当的情况，会大大缩短色谱柱的使用寿命。为了延长色谱柱的使用寿命，应对色谱柱进行适当的保护。　　反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈-水中的；由于色谱柱在储存或运输过程中固定相可能会干掉，这会引起键合相的空间结构发生变化。因此，新的色谱柱在用来分析样品之前，请一定要充分平衡色谱柱。反相色谱柱的平衡方法是：以纯乙腈或甲醇作流动相，首先用低流速0.2ml/min将色谱柱平衡过夜，然后，将流速增加到0.8mL/min冲洗30min以便将色谱柱的填料充分平衡至最佳状态。平衡过程中，将流速缓慢地提高直到获得稳定的基线，这样可以保证色谱柱的使用寿命，并且保证在以后的使用中，获得分析结果的重现性。请一定确保所使用的流动相和乙腈-水互溶。如果您所使用的流动相中含有缓冲盐，应注意首先用20倍柱体积的5%的乙腈-水流动相“过渡”，然后使用分析样品的流动相直至得到稳定的基线。　　
对于正相色谱柱来讲，硅胶柱或极性色谱柱需要更长的时间来平衡。这些色谱柱在出厂测试后是保存在正庚烷中的，如果极性色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡。当使用乙醇、异丙醇、乙酸等粘度大的流动相时，色谱柱的平衡时间要延长，甚至要加倍。

分
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hujiangtao

第1楼2017/02/10

应助达人

平衡不好的话保留时间会漂移的

0

夏天的雪

第2楼2017/02/10

应助达人

色谱柱使用之前要过渡，平衡，最好舍去第一针

0

m3191263

第3楼2017/02/10

平衡的时候压力变化特别大，还在报警，是因为什么呢

0

支点

第4楼2017/02/10

应助达人

压力变化一班是流动相比例变化大形成的，要看你原来是什么，变成什么，用多长时间改变。当然另外一个情况就是有缓冲盐结晶或样品杂质堵柱子。
m3191263(m3191263) 发表:平衡的时候压力变化特别大，还在报警，是因为什么呢

0

m3191263

第5楼2017/02/10

压力一直再跳，很不稳定一会大一会小
支点(zhx_fs_ln)发表: 压力变化一班是流动相比例变化大形成的，要看你原来是什么，变成什么，用多长时间改变。当然另外一个情况就是有缓冲盐结晶或样品杂质堵柱子。

0

lijing320323

第6楼2017/02/13

一般平衡30min，到基线平稳

0

支点

第7楼2017/02/13

应助达人

有可能是泵里有气泡，多purge一会
m3191263(m3191263) 发表:压力一直再跳，很不稳定一会大一会小

0

qaz15000

第8楼2017/02/14

其实很多人忽略了平衡的重要性，压力平衡只是一个方面，流动相里不只有甲醇乙腈水缓冲盐那么简单，平衡是一个很精细的过程，研究清楚了可以解决很多问题。

0

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