【色谱体验】很无语的一次Waters高效液相色谱故障的排查
仪器正常的时候干什么都很顺心,要是突然哪天仪器也罢工了,那也是很郁闷的。这么,前两天还转得很好的高效液相色谱也不听使唤了。今天早上刚好要测试样品,
Waters高效液相色谱开机一直嘀嘀嘀的报警声响个不停,碰巧那天熟悉Waters高效液相的同事请假了,留下的是一批刚工作不久的大学生,他们只会简单的仪器操作使用,比如开机,配流动相,手动进样,数据处理,至于仪器出故障,就束手无策了。而我也已经有差不多10年没有接触过高效液相色谱了,说实在的,心里也是没底呀,但是也没有办法,硬着头皮也得上呀。
先是去百度、仪器论坛等网络平台去查询一番,你还别说,真找打了一些有关Waters高效液相色谱的一些维护和故障排除知识,于是就对照一一来尝试一下。
首先是流动相,重新配制一瓶新的:取来一瓶色谱纯乙腈用超纯水按照4:6比例配制500mL,然后用真空抽滤脱气,
装入试剂瓶,仪器软件打开走基线,问题依旧,基线很高(信号值3000多),报警声持续在响个不停。流动相这块的问题应该可以排除了。
接下来进行进样阀和高压恒流泵的检查,高压泵在前几天测试完成冲洗了近2个小时,应该不会堵塞,把进样阀头拆下来用甲醇超声清洗10分钟,然后装回去再试。仪器基线还是很高,走了近2个小时就是不下来。难道是是色谱柱不行了?打电话问同事,说是刚换了没多久,这下总算放心了。
不会是工作站出问题了吧?果断调高流动相流速,看信号是否有明显变化,流速从0.2mL/min调到0.8mL/min,信号基本上没有变化,看来问题就出在这里了。关闭仪器,退出工作站,彻底关机,断电。等到下午上班的时候,开电脑,开仪器,打开工作站,走基线,报警声消失了,30分钟后,信号从3000多下降到100多,基本上是很平稳了。接下来进标做工作曲线,样品测试一切正常,问题解决了。
说来也怪,上午接通电源,开机,开仪器,工作站运行也是重新开的,上午怎么折腾都不行,下午重启一下就行了。看来精密仪器的日常维护很重要呀,稍有怠慢就给你撂摊子。
小结一下:对于高效液相色谱,主要从流动性及样品制备,高压泵及时清洗管路和泵,色谱柱及工作站的维护这四个方面入手进行日常维护和保养。流动相要脱气并定期更换,样品要过0.22微米的有机系滤膜过滤;高压泵升高流速时梯度升高,比如每次升0.2mL/min,仪器使用完了要及时冲洗管路和高压泵,冲洗色谱柱至少1个小时,不时检查工作站是否有不正常现象;通过这些日常维护,仪器使用的问题会大大减少。