辣酱制品及腐竹中碱性橙与碱性嫩黄的检测方法

海润Kevin

2017/08/14

私聊

前处理综合讨论

1 主题内容与适用范围
本方法规定了酱制品和腐竹中碱性橙2，碱性橙21，碱性橙22，碱性嫩黄的LCMSMS测定方法。
本方法适用于酱制品与腐竹中碱性橙2，碱性橙21，碱性橙22，碱性嫩黄的定性、定量分析。
2 原理
碱性橙是一种碱性染料，包括碱性橙2，碱性橙21，碱性橙22等。碱性橙染料主要用于纺织品、皮革制品及木制品的染色。根据美国卫生研究所化学品健康与安全数据库资料表明：摄取吸入以及皮肤接触该物质均会造成急性和慢性的中毒伤害。有确凿的动物实验数据表明，该物质为致癌物，在接触该物质时需使用无孔手套和呼吸面罩，以免对人体造成伤害。我国国家标准GB2760《中华人民共和国食品添加剂使用卫生标准》中，未将碱性橙纳入食品添加剂范围。但是，由于碱性橙比其他水溶性染料如柠檬黄、日落黄等更易于在豆制品、黄鱼、辣椒制品上染色且不易褪色，而且成本低，因此一些不法商贩用碱性橙对豆制品、黄鱼、辣椒制品等产品进行染色，以次充好，以假冒真，欺骗损害消费者，危害消费者的身体健康。样品经乙腈提取
3 试剂和材料
3.1 碱性橙2标准品
3.2 乙腈：色谱纯
3.3 甲醇：色谱纯
3.4 Agela Technologies Cleanert C18
3.5 Agela Technologies Cleanert PSA
4 仪器设备
4.1 岛津LC-MSMS 8050
4.2 湘仪L550离心机
4.3 EYEL 4 1100旋转蒸发仪
4.4 EYEL 4 分液漏斗振荡器
4.6 离心管：50mL
4.7 滤膜：0.22μm 尼龙
5 分析步骤
5.1提取
称取样品（辣酱制品及腐竹制品）（1.00±0.02）g于50mL离心管中；加入10mL提取液，涡旋混合，震荡5min超声提取5min，4000r/min离心5min；取上清液备用。备注：提取溶剂（乙腈）
5.2净化
2ml离心管中加入PSA0.1g以及C18 0.1g，取提取液1ml加入到2ml离心管中，涡旋混匀高速离心3min，取上层提取液过0.22μm尼龙滤膜于进样瓶中。
6 仪器条件(LC-MSMS8050)
6.1 质谱参数
质谱参数：离子源ESI源;Nebulizing Gas Flow: 3 L/min; Heating Gas Flow: 10 L/min; Interface Temperature300 ℃；DL Temperature 250 ℃；Heating Block Temperature 400℃ Drying Gas Flow: 10 L/min

化合物	母离子	子离子	Q1	碰撞能量（CE）	Q3 pre Bias（v）
			锥孔电压
碱性橙2	213	121.3	-30	-21	-20
		77.25		-20	-12
		120.3		-30	-19
碱性橙21	315.2	300	-12	-25	-17
		144	-26	-44	-21
碱性橙21	391.2	376	-30	-29	-23
		220		-40	-19
碱性嫩黄	268.2	147	-30	-28	-22
		122		-24	-30

6.2 液相参数：
色谱柱：shim-packXR-ODSⅢ（1.6μm）
流动相：A为5mmol乙酸铵溶液
B为乙腈
进样量：2μL
流动相曲线如下：

7.1 标准品线性
碱性橙及碱性嫩黄标准品储备液10mg/kg，稀释至10μg/kg、5μg/kg、1μg/kg、0.5μg/kg、0.1μg/kg上机分析，线性关系及谱图如下图。备注：稀释溶剂为（水:甲醇=8:2）

碱性橙2

碱性橙21

碱性橙22

碱性嫩黄
7.2回收率
样品处理需做阴性基质标曲，回收率一般在70%左右。

基质	添加水平（ug/kg）	碱性橙2 回收率%	碱性橙21 回收率%	碱性橙22 回收率%	碱性嫩黄回收率%
腐竹	5	70.1	72.3	69.5	70.2
酱制品	5	74.5	71.8	70.5	68.9