【我爱创新】+记一次Agilent1260液相培训
图1:美女老师在讲课
一、快速液相注意事项
1.应当使用亚二微米颗粒(1.8μm)的色谱柱(RRHT色谱柱),如果使用 5.0μm或3.5μm 的色谱柱,RRLC 仅相当于HPLC。
2.使用 RRHT色谱柱时,如果流速较大且压力较高,关闭泵以前需将流速逐渐降低以避免压力波动过大,保护色谱柱。
3.应当使用 0.2μm孔隙的滤膜过滤流动相及样品。
4.应当正确安装接头以保证良好的峰形。
图2:正确安装接头以保证良好的峰形
5.如果流速低于 0.5ml/min时,尤其是当使用 2.1x50mm RRHT色谱柱时,请确保:在自动进样器之后使用0.12mm 内径的红色管线;同时检测器必须使用半微量池(5μl)或微量池(2μl)以确保良好的峰形;如需控温,则需使用低扩散预热器。
图3:柱温箱
6.当柱温很高时,可以使用柱后冷却器对流动相降温以保持和检测器温度一致以获得稳定的基线。
7.在低流速下如果要快速变化系统的溶剂梯度,可以旁路阻尼器和混合器,以便将系统的延迟体积从600-800μL减小至120μL。
8.在低流速下如果要快速变化系统的溶剂梯度,可以使用自动进样器的自动降低延迟体积功能。
9.荧光检测器,因为流通池承压很小,所以流路出口不要弯折,直接导入废液瓶中。
10.蒸发光散射检测器,废液瓶不能盖盖子,废液管不能伸到废液液面下面,废液管不能弯折,否者会影响检测结果和降低灵敏度。
二、Agilent1260常见问题解决方法
1.工作站无法联机:确认打开Agilent 1260 所有模块电源。
查看Agilent1260网卡地址,如果使用bootp程序,请查看仪器配置中IP设置,如果未使用bootp程序,通常仪器默认地址为:192.168.254.11。
查看电脑网卡地址,"开始->控制面板->网络连接",双击"本地连接",单击“属性”,双击"Internet协议4(TCP/IP) ",选择“使用下面得IP地址”,填入"IP地址"如:192.168.254.10,"子网掩码":255.255.255.0。请将IP地址与Agilent 1260的IP地址前9个数字设为一样,后一位设为1~254之间,但不与Agilent 1260网卡地址相重复即可。
2.改变数据、序列和方法存储路径
选择“视图->首选项”或者,打开“首选项”设置。点击“添加”,将已建好的新的存储路径添加到“序列路径”、“数据路径”和“方法路径”中,“确定”保存。在“运行控制->样品信息”或者“序列->序列参数”中即可出现新的路径选项。
此次培训,虽然时间较短,但收获颇多,对于气相色谱仪的使用有很大的帮助,需要自己在今后的工作学习中来逐步消化运用,高级讲师,用丰富的经验,结合理论讲解,确实收获很大,对遇促进我们的实验室建设,具有很大意义。