液相色谱用的是C18的柱子，示差检测器，检测磺丁基醚倍他环糊精中被他环糊精的残余量，流动相22.5%的甲醇水，流速0.4ml/min，柱温25度，但是反应液的谱图出现了两个倒峰还分不开，请大神们帮忙分析下怎么回事？

应助达人

第一，检查是不是正常操作，建议测一个其他样品，看是不是出现负峰，示差检测器很容易出现负峰。第二，分离度不够建议调整流动相比例，甲醇水15比85看下

估计是反应液中的杂质，

应助达人

示差检测器需要多平衡一会儿，调节流动相比例

应助达人

柱温尽量与示差检测温度一致，并进一步优化流动相等条件。

测了一个环糊精标样，正常出峰的，改变了色谱条件，流动相还是22.5%的甲醇水，柱温升高到35°C，流速也降到了0.4ml/min，结果就出了下面谱图里面的正峰了，但是峰还是分不开，接下来想用极性更小的乙腈代替甲醇试试，看看效果如何。也希望前辈能指导一二，谢谢了

反应液确实是没有经过除杂处理的，想着就是要定量看看环糊精的参与量而已，因该没有太大影响。

示差检测器的温度怎么看或者怎么调节呢，实验室的同学说，检测器自买过来后，上面的参数就没动过，有时候信号一直增加，我的基线位置就会偏离零值好多，我也就按下自动调零而已，实在不知道怎么弄了。

应助达人

示差检测器温度一般是固定的，需要调节的是柱温。示差的温度各型号大同小异，可查说明书或向售后询问