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请教GPC色谱柱选择问题,谢谢!

  • Insp_1f493371
    2019/05/24
  • 私聊

凝胶色谱(GPC)

  • 现有一台Waters1515/2414凝胶色谱仪,用的柱子是两根HR2(测量范围500-20000)串联,样品的分子量在2000左右,多分散性,感觉目前的测量结果中,低分子量(1000以下)部分的分子量信息在GPC图上反映不出来,是不是分离效果不行?要想得到样品中分子量1000以下的信息,把柱子换成HR0.5(测量范围0-1000)和HR2(测量范围500-20000)两根串联是否可行?谢谢!
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  • 小不董

    第1楼2019/05/26

    应助达人

    你能上图吗?没看到图不好说,小于1000分子量的物质是没信号吗?增大浓度有吗?另你在做标准曲线时,低于1000分子量的肯定有的吧,这个有信号吗,或者找个低于1000的标准品再测试下。
    如果意思是低于1000分子量的,分离不好,选择用小分子的色谱柱当然更好了,可以用两跟柱子串联使用,只是其标准曲线需要重新做,看看是否成线性。

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  • Insp_1f493371

    第2楼2019/05/27

    谢谢版主老师!标样曲线上有,PS,580,可能是分离不好的原因。对于选用HR0.5和HR2两根柱子串联(别的单位有这样组合的,测量同类聚合物),我有个疑问:两根柱子串联使用时,是不是每根柱子的排阻极限和渗透极限均需要满足测量物高低分子量的要求?因为HR0.5的测量范围是0-1000,其排阻极限岂不是不满足目标物的范围(分子量2000左右)了吗?谢谢!

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  • Insp_1f493371

    第3楼2019/05/27

    谢谢版主老师!标样曲线上有峰,PS,580,可能是分离不好的原因。对于选用HR0.5和HR2两根柱子串联(别的单位有这样组合的,测量同类聚合物,也能测到小分子的峰),我有个疑问:两根柱子串联使用时,是不是每根柱子的排阻极限和渗透极限均需要满足测量物高低分子量的要求?因为HR0.5的测量范围是0-1000,其排阻极限岂不是不满足目标物的范围(分子量2000左右)了吗?谢谢!

    小不董(doxw0323) 发表:你能上图吗?没看到图不好说,小于1000分子量的物质是没信号吗?增大浓度有吗?另你在做标准曲线时,低于1000分子量的肯定有的吧,这个有信号吗,或者找个低于1000的标准品再测试下。
    如果意思是低于1000分子量的,分离不好,选择用小分子的色谱柱当然更好了,可以用两跟柱子串联使用,只是其标准曲线需要重新做,看看是否成线性。

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  • 小不董

    第4楼2019/05/28

    应助达人

    你可以看看论坛里置顶的关于凝胶色谱的原理帖子,

    Insp_1f493371(Insp_1f493371)发表: 谢谢版主老师!标样曲线上有峰,PS,580,可能是分离不好的原因。对于选用HR0.5和HR2两根柱子串联(别的单位有这样组合的,测量同类聚合物,也能测到小分子的峰),我有个疑问:两根柱子串联使用时,是不是每根柱子的排阻极限和渗透极限均需要满足测量物高低分子量的要求?因为HR0.5的测量范围是0-1000,其排阻极限岂不是不满足目标物的范围(分子量2000左右)了吗?谢谢!

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  • Insp_1f493371

    第5楼2019/05/28

    好的,谢谢!我先学习下

    小不董(doxw0323) 发表:你可以看看论坛里置顶的关于凝胶色谱的原理帖子,

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