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原梯度分离方法无法分开5种物质,怎样修改梯度分离方法

  • Insm_67cc8ef5
    2019/06/13
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 照搬了文献上梯度分离方法做5种标准样品,结果是完全不能分开出了一个长达7分钟的大峰。用该梯度方法做单个标样,标样都在8.9分钟左右出峰,出峰时间非常接近。想改进这个梯度方法把5种标样完全分离,可是不会改。求高手指导一下怎样改梯度分离方法呀?
    原方法 流速0.2ml/min 柱温40度
    时间 流动相甲醇(含0.2%甲酸)的比例 流动相水(含0.2%甲酸)的比例
    0.01 25
    5 40
    20 80
    22 80
    22.01 25
    30 25

    文献上色谱柱是shim-pack VP-ODS (2mm*250mm i.d.5微米) ,
    我实验室只有C18反相柱子(4.6mmi.d.,150mm色谱柱长度,5UM色谱填料粒径)我照搬文献上原方法,结果分离效果非常不理想,如何改进原方法
    +关注 私聊
  • hujiangtao

    第1楼2019/06/13

    应助达人

    普通色谱柱0.2流速有点低

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    +关注 私聊
  • welewolf

    第2楼2019/06/13

    应助达人

    先试试增加流速,从0.2逐步升至1

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