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现检测一物质但液相色谱峰不好

woke123789

2019/09/03

液相色谱（LC）

先简单介绍一下检测物质，检测的两个物质都是二元弱酸，第一个峰的弱酸电离常数pKa1=1.92，pka2=6.27，紫外特征吸收波长为209nm;第二个峰的弱酸电离常数pKa1=3.03，pKa2=4.04，紫外特征吸收波长为211nm.
色谱条件：色谱柱：型号ZORBAX SB-C18（色谱柱规格4.6*150mm 5um）；检测器：UV；检测波长：210nm；流速：1mL/min；流动相：甲醇：磷酸溶液（v/v，体积比）=3:97（磷酸溶液是含千分之一85%磷酸的水溶液）磷酸溶液pH=2.123。
先需向大家请教的是：我的一号峰拖尾总是很严重，希望大家给点建议

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浪淘沙隐

第1楼2019/09/03

首先你样品过载了，其次你这个流动相pH疑似不合适，待测物pKa从2~6都有，最合理的就是选用8以上的pH。但是这样一来肯定就没保留了。建议先降低浓度或进样量，再进行重复性验证，做重复性的时候最好样品浓度有一点差异，以便检查样品在流动相中是否有两种形态。如果还不行试试把磷酸换成三氟乙酸，还不行就只能尝试其他分离方式了。

0

hujiangtao

第2楼2019/09/03

应助达人

降低浓度再试一下

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检测老菜鸟

第3楼2019/09/03

应助达人

拖尾严重的可以调节pH,往上调节一下估计可以。

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