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液相色谱柱使用寿命问题?

  • 提莫酱爆小蘑菇
    2019/10/31
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 最近用C18柱分离四个相似结构的化合物。

    流动相为:20%甲醇:50%甲醇-50%乙腈=60:40

    我用一根相对高效的C18柱分离这四个,其出峰时间,分离度都还能满意,除了其中一个峰有点倾斜以外,其余都还符合预期。

    然而当我用一根相对普通的C18柱分离时,发现其峰形异常,走了好几针都一样,正常而言,除了保留时间和分离度会有些变化以外不应该这样。

    于是怀疑色谱柱柱效降低的原因,于是更换了一根相对比较新的普通C18柱,与上面那根同款,使用时间短一些,发现分离度尚可,但是有一个峰保留时间<3min,且峰形略倾斜,塔板数<5000。

    峰形异常的普通C18柱流动相为0.1%磷酸+乙腈,配保护柱,使用约9个月,一周5-6天,每天约50个样,且样品溶剂相对复杂。

    峰形略倾斜的普通C18柱流动相为0.1%TFA+乙腈,配保护柱,使用约5个月,一周5-6天,每天约30个样,样品分子量较大。

    分离度良好的高效C18柱流动相为0.1%磷酸+乙腈,配鬼峰柱,无保护柱,使用约一个月,样品较少,偶尔分析成品样,样品简单。

    以下为三张图。

    普通色谱柱在正常使用情况下一般使用限为多久?

    像图一的色谱峰,这根柱子走保留相对较久的样品时峰形又比较好,比较对称,那么是否应该继续使用,如何挽救?

    图二这种图,是否代表色谱柱柱效已开始有降低的情况?

    图三为新的相对高效的色谱柱,最前面一个峰出峰位置为5min,其峰形不好是跟保留时间有关系还是跟色谱柱的选择性有关系呢?


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  • qhz0823

    第1楼2019/10/31

    应助达人

    虽然同为C18色谱柱,但是色谱柱品牌甚至填料批次对色谱柱的性能都有影响,并且色谱柱对不同的样品选择性不一样,分析一个样品,色谱图不好,并不一定是色谱柱柱效下降,可能是这根色谱柱不适合分析此样品,评价色谱柱性能的高低,建议按照厂家说明书的提供的评价方法,对色谱柱进行评价,在此评价方法下,柱效低于一定的理论踏板数,则表明色谱柱柱效降低,可能到了报废的情况。从提供的三张谱图来看,第二张色谱图用的色谱柱可能存在柱效降低的情况。

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  • 提莫酱爆小蘑菇

    第2楼2019/10/31

    好的谢谢回答,不过第一个跟第二个图的色谱柱是同一款,只是使用时间不同,第一个用了9个月,第二个用了5个月

    qhz0823(v2947939) 发表:虽然同为C18色谱柱,但是色谱柱品牌甚至填料批次对色谱柱的性能都有影响,并且色谱柱对不同的样品选择性不一样,分析一个样品,色谱图不好,并不一定是色谱柱柱效下降,可能是这根色谱柱不适合分析此样品,评价色谱柱性能的高低,建议按照厂家说明书的提供的评价方法,对色谱柱进行评价,在此评价方法下,柱效低于一定的理论踏板数,则表明色谱柱柱效降低,可能到了报废的情况。从提供的三张谱图来看,第二张色谱图用的色谱柱可能存在柱效降低的情况。

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  • xiaogumd11

    第3楼2019/10/31

    应助达人

    样品量很多吗?

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  • 提莫酱爆小蘑菇

    第4楼2019/10/31

    样品量不多的,响应也就1.200mv

    xiaogumd11(v3247983) 发表:样品量很多吗?

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