我是风儿
第1楼2020/04/03
氧乐果:简单基质的,提取:取新鲜糜样2.0g于50mL塑料离心管中或取干样0.5g【2】于50mL塑料离心管中加2mL水,放置至少30分钟[2]。加入20mL乙酸乙酯和10g无水硫酸钠,均质0.5min,用10mL乙酸乙酯清洗均质头,合并提取液4000r/min离心5分钟,上清液经装有10g无水硫酸钠的漏斗脱水于鸡心瓶中,残渣再用20mL乙酸乙酯涡漩洗涤,4000r/min离心5分钟,上清液并入鸡心瓶中,再用10mL乙酸乙酯冲洗漏斗上的残渣合并洗液35℃浓缩至干。
净化:用乙酸乙酯2mL*3次漩涡振荡洗涤鸡心瓶,过经5 mL乙酸乙酯活化过的上填1cm高无水硫酸钠的硅胶柱(LC-Si 0.5g 6mL硅胶固相萃取小柱57051: 正相萃取:填料是强极性的,洗脱溶剂是用中弱极性的,主要除去极性杂质。反相萃取:填料是弱极性的,洗脱溶剂是用极性的,主要除去极性样液里面的弱极性杂质。弗罗里硅柱也是正相萃取小柱,填料极性比硅胶柱弱些)待洗涤液流完接近硅胶柱中无水硫酸钠顶端时,再用乙酸乙酯洗, 弃去前9 mL洗液,继续用乙酸乙酯洗并收集15mL于15mL刻度玻璃离心管中,35℃水浴氮气吹干,用1mL乙酸乙酯(色谱纯)定容,上机测试。
复杂基质的:提取:取新鲜糜样2.0g于50mL塑料离心管中或取干样0.5g于50mL塑料离心管中加2mL水,放置至少30分钟。加入20mL乙酸乙酯和10g无水硫酸钠,均质1min,用10mL乙酸乙酯清洗均质头,合并提取液4000r/min离心5分钟,上清液经装有10g无水硫酸钠的漏斗脱水于鸡心瓶中,残渣再用20mL乙酸乙酯涡漩洗涤,4000r/min离心5分钟,上清液并入鸡心瓶中,再用10mL乙酸乙酯冲洗漏斗上的残渣合并洗液40℃浓缩至干。
净化:用丙酮 正己烷(1 1, V V)2.0mL?2次漩涡振荡器洗涤鸡心瓶,将洗液移至离心管A中,加入0.5gPSA粉末,漩涡振荡静置,取上层清液移至另一离心管B,再将PSA粉末用丙酮 正己烷(1 1, V V)2.0mL?2次漩涡振荡洗涤,合并洗涤上清液于离心管B中,40℃氮吹干,再用乙酸乙酯2.0mL?2次漩涡振荡洗涤离心管B,洗液过硅胶柱。再用乙酸乙酯洗, 弃去前9 mL洗液,继续用乙酸乙酯洗并收集15mL于15mL刻度玻璃离心管中,40℃氮吹干,用1mL乙酸乙酯定容,上机测试。
氧化乐果等极性较大,出峰时间比较甲,色谱柱的柱前端比较容易脏,做十几针的样品就要进行切割柱前端10多厘米,当然也要根据你们样品的净化程度来看看的,