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凝胶电泳质量的决定因素
lijing320323
2020/04/19
私聊
食品常规理化分析
为了使样品分离得快,操作方便,便于记录结果和保存样本,要求凝胶有一定的物理性质,合适的筛孔,一定的机械强度,良好的透明度。这些性质很大程度上是由凝胶浓度和交联度所决定的。
1、凝胶度(T%):指100ml凝胶缓冲液中含有的单体和交联剂总克数称为凝胶浓度;
2、交联度(C%):交联剂占单体加交联剂总量的百分数为交联度,聚丙烯酰胺凝胶的强度、弹性、透明度、年度和孔径大小均取决于这两个重要参数,当C保持恒定时,凝胶的有效孔径随着T的增加而减少,当T保持恒定,C为4%时,有效孔径最小,C大于或小于4%时,有效孔径变大,C大于5%时凝胶变脆,不宜使用,最常用的为2.6%和3。
3、a与b的比例很重要,富有弹性且完全透明的凝胶其比例应在30左右,常用的为29:1
T=(a+b)/m*100%;C=b/(a+b)*100%
a为丙烯酰胺的克数,b为甲叉双丙烯酰胺的棵树,m为缓冲液体积(ml)
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