不怕领导约爬山,实验室省钱有妙招
——廉价版自制纳升级液相色谱柱
大家好,我是生科院仪器平台管理员SKY,最近老有小伙伴哭诉纳升级的液相色谱柱又堵了,按这个速度堵下去估计很快领导就要约我爬山了。
SKY就不明白了,我们平台财大气粗会差这几根柱子钱,然而当SKY查了一下毛细管色谱柱的价格后……
只能对这个小伙伴说,再这么频繁的堵柱子,我就带你去爬山。但是咱也不能这么见死不救,于是乎,我们廉价版自制纳升级液相色谱柱就此诞生。
具体步骤:
1、毛细管准备,将一根聚酰亚胺毛细管的一端拉细至 5um 左右,其尖端可以起到过滤器的作用,同样也可以作为 ES1 的发射源。目前常用的规格为外径360um,内径有75um、100um、150um三种规格。SKY购买的毛细管10米售价1000元左右,算下来一根柱子毛细管价格25元左右。
2、毛细管针尖拉制,针尖的形状决定着液相色谱质谱联用时的离子化效率。使用SUTTER公司的P-2000拉针仪进行拉制。
(拉针仪的方法设定影响拉针效果,此参数经多次试验得出,拉出的毛细管针尖平滑,易于填充且在液相色谱与质谱联用是离子化效率高)
在透视镜下观察针尖效果
3、色谱柱填充,首先利用甲醇混合色谱柱填料(本次结果已C18填料为例)
填充装置利用磁力搅拌器不断搅拌得到C18填料的C18甲醇混合悬浊液,高压氮气将混匀的填料甲醇悬液压入毛细管色谱柱,针尖可保证填料无法外泄。
4、毛细管柱针尖处理,利用乙腈浸泡毛细管针尖30分钟,取出浸泡好的针尖,用无尘纸擦拭干净。
5、色谱柱组装,利用带加电端的360um四通阀完成组装,也可用1/32英寸内径的四通阀加1/32转360um套管完成组装。
四通阀效果示意图
6、填充液置换,利用纳升级液相色谱,将填充色谱柱的甲醇利用流动相进行置换后置于洁净干燥处保存。
1、 色谱柱柱效检测
对比自制柱柱效与商品化色谱柱柱效。两者之间几乎没有差别。SKY可以大声的宣布廉价版自制纳升级液相色谱柱成功。
自制柱BSA分离效果图