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液相峰拖尾

液相色谱(LC)

  • 今天走特女贞苷对照品,发现峰性是这样子的,请问出现这种情况应该如何处理?
    色谱条件甲醇-水(40:60),波长224nm,色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。
  • 该帖子已被版主-轶辰加5积分,加2经验;加分理由:鼓励发帖
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  • Spenser

    第1楼2020/07/03

    峰型是这样子的。

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  • 砂锅粥

    第2楼2020/07/03

    应助达人

    这个感觉不太像拖尾,像是有干扰?
    楼主是否有不同源的标样试试。

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  • 轶辰

    第3楼2020/07/03

    应助达人

    后面的小包更多可能是残留,可能来自样品或者系统,走一针空白排查下系统的污染。如果是样品残留,不影响定量的话也无所谓,如果影响定量,可以优化下走样条件,如改变流动相比例等

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  • Spenser

    第4楼2020/07/03

    试过了,都是这种情况

    砂锅粥(czcht) 发表:这个感觉不太像拖尾,像是有干扰?楼主是否有不同源的标样试试。

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  • Spenser

    第5楼2020/07/03

    是的。更多的可能是色谱柱污染了,之前也尝试过更改流动相比例,发现情况一样,还是有肩峰。后来换了一台仪器走,情况也是这样。是不是柱子已经没用了?

    轶辰(m3191395) 发表:后面的小包更多可能是残留,可能来自样品或者系统,走一针空白排查下系统的污染。如果是样品残留,不影响定量的话也无所谓,如果影响定量,可以优化下走样条件,如改变流动相比例等

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  • 砂锅粥

    第6楼2020/07/03

    应助达人

    不同源都有这种情况的话考虑一下是哪里污染了。

    参考一下以下内容。

    1.硅醇基相互作用(硅胶类色谱柱)
    使用封端或专用柱;增大缓冲液浓度;降低流动相 pH 以抑制硅醇基相互作用;使用竞争碱;采用改变极性相互作用的衍生化解决方案;如果没有效果,尝试反向运行色谱柱;如果结果改善,则说明很可能是柱污染所致;清洗或更换色谱柱

    2.柱外效应
    检查系统,各部件的连接管线是否过长,并更换为较短管线;如果使用的是高效柱,将内径 0.18 mm 的绿色管线换成内径 0.12 mm 的红色管线

    3.色谱柱在高温下降解(硅胶基色谱柱)
    将温度降低到 40 °C 以下,特别是使用高 pH 流动相时;使用高温兼容色谱柱,如立体保护的硅胶柱、混合型柱、聚合物柱、氧化锆柱等

    4.色谱柱在高 pH 下降解(硅胶类色谱柱)
    使用特别适合在较高 pH 下操作的高覆盖率或双交联固定相(比如, ZORBAX Extend-C18),或使用聚合物、混合型或氧化锆反相柱

    5.色谱柱塌陷
    反冲;如果所有峰的峰形都差或出现双峰,说明可能存在色谱柱空洞;更换色谱柱

    收集整理自安捷伦耗材手册。

    Spenser(Insm_c43fdfe3) 发表:试过了,都是这种情况

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  • p3068973

    第7楼2020/07/03

    应该是柱子的问题,换新的或者干脆反用

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  • Spenser

    第8楼2020/07/03

    嗯嗯好的。这个色谱柱清洗的话是怎么清洗的?

    砂锅粥(czcht) 发表: 不同源都有这种情况的话考虑一下是哪里污染了。参考一下以下内容。1.硅醇基相互作用(硅胶类色谱柱)使用封端或专用柱;增大缓冲液浓度;降低流动相 pH 以抑制硅醇基相互作用;使用竞争碱;采用改变极性相互作用的衍生化解决方案;如果没有效果,尝试反向运行色谱柱;如果结果改善,则说明很可能是柱污染所致;清洗或更换色谱柱2.柱外效应检查系统,各部件的连接管线是否过长,并更换为较短管线;如果使用的是高效柱,将内径 0.18 mm 的绿色管线换成内径 0.12 mm 的红色管线3.色谱柱在高温下降解(硅胶基色谱柱)将温度降低到 40 °C 以下,特别是使用高 pH 流动相时;使用高温兼容色谱柱,如立体保护的硅胶柱、混合型柱、聚合物柱、氧化锆柱等4.色谱柱在高 pH 下降解(硅胶类色谱柱)使用特别适合在较高 pH 下操作的高覆盖率或双交联固定相(比如, ZORBAX Extend-C18),或使用聚合物、混合型或氧化锆反相柱5.色谱柱塌陷反冲;如果所有峰的峰形都差或出现双峰,说明可能存在色谱柱空洞;更换色谱柱收集整理自安捷伦耗材手册。

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  • Spenser

    第9楼2020/07/03

    换了一个新的柱子,峰型良好,没有出现之前的情况。如果是这样的话旧的色谱柱是不是就不能用了,没有挽救的余地?

    p3068973(p3068973) 发表:应该是柱子的问题,换新的或者干脆反用

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  • wjf1234wjf

    第10楼2020/07/03

    换新试用一下

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