峰面积分离不开

应助达人

这个峰可能有两个物质，也有可能是一个物质，如果是一个物质，那可能是柱效降低导致峰型变差；也有可能是两个物质，没有完全分离开，需要调整流动相比例，采用梯度淋洗的程序让其分离开。试一下改变流动相比例，看看是不是可能分的更开

楼上说的有道理，用的DAD检测器的话，可以看下峰纯度，如果是同一种物质，那很可能是柱子的筛板堵了，可以反冲柱子试一下；如果不是同一种物质，那就是分离度不好，可以试着把乙腈比例减少到15～20%，会改善分离度，或者直接用梯度方法

应助达人

换一个新色谱柱试一下，如果没问题，那就是那根色谱柱污染了，彻底清洗一下再看看能不能恢复，正向清洗不能恢复的话，问一下色谱柱厂家能不能反向清洗

应助达人

以前该样品是几个峰。

应助达人

用的N2000软件，就不可能是DAD了

应助达人

这个方法既然做过，那就可以排除溶剂效应，以前标品有没在目标峰后有没其他峰呢？应该没有的。这应该就是一个组分，原因可能是死体积，重新接一下柱子，特别是柱头。如果还是这样尝试换一根柱子，可能是柱头有塌陷。

应助达人

这个方法既然做过，那就可以排除溶剂效应，以前标品有没在目标峰后有没其他峰呢？应该没有的。这应该就是一个组分，原因可能是死体积，重新接一下柱子，特别是柱头。如果还是这样尝试换一根柱子，可能是柱头有塌陷。

换柱子

调整一下流动相吧，估计是2个物质没分开。