GCMSMS法测定椰子油中的联苯，2-苯基苯酚和蒽醌

weiqing

2020/09/29

私聊

气质联用（GCMS）

摘要：由于农药的滥用，环境污染和加热处理等原因造成椰子油中容易检出联苯，2-苯基苯酚和蒽醌等有害物质。故建立了稳定同位素稀释-气相色谱串联质谱法简单、快速、高效的检测椰子油中联苯，2-苯基苯酚和蒽醌的方法。椰子油样品经乙腈溶剂提取后，在-20℃冰箱中冷冻2 h净化除油，上清液过0.22μm滤膜后供GCMSMS分析，无需再经过SPE等前处理净化步骤，加入的稳定同位素内标可以补偿基质效应干扰。方法验证结果表明，三种化合物的线性范围在0.01 ~ 5 mg/kg区间内的线性相关系数均大于0.999，每种化合物的检出限为0.01 mg/kg，在三个浓度水平的加标回收率为86.3% ~ 95.3%，相对标准偏差为1.4% ~ 1.8%。本方法简单，快速，可靠，可用于椰子油中联苯，2-苯基苯酚和蒽醌的快速准确检测。

适用范围

本方法规定了检测椰子油中的联苯，2-苯基苯酚和蒽醌的条件和分析步骤。

本方法的检测限为0.01 mg/kg，定量限为0.02mg/kg（脱臭馏出物样品的检测限为0.05mg/kg，定量限为0.10mg/kg）。

2．原理

椰子油中的联苯，2-苯基苯酚和蒽醌由乙腈提取，经低温冷冻净化，气相色谱-质谱分析内标法测定含量。

3．试剂（除非另有说明，试剂均为HPLC级）

3.1 乙腈

3.2 乙酸乙酯

4．标准品

4.1 联苯

4.2 蒽醌

4.3 2-苯基苯酚

4.4 联苯-D10

4.5 蒽醌-D8

5．溶液

5.1 内标标准储备液（100μg/mL）：准确称取适量（4.4）和（4.5）的标准品，用乙酸乙酯溶解后定容，配制成浓度为100μg/mL的内标标准储备溶液。

5.2 内标标准溶液（2μg/mL）：准确吸取1.0mL5.1，用乙腈稀释定容至50 mL。

5.3 标准储备液(100μg/mL)：准确称取4.1、4.2和4.3各10mg，用乙酸乙酯溶解并定容至100mL。

5.4标准溶液（1μg/mL）：准确吸取1.0mL 5.3，用乙腈稀释定容至100mL。

5.5 标准曲线：分别移取5.4的标准溶液和5.2 内标标准溶液适量于1mL容量瓶中用乙腈配制成（1，5，10，20，100，200，500ng/mL）不同浓度的溶液（其内标溶液浓度为40 ng/mL）。

6.仪器设备

气相色谱-三重四级杆串联质谱
分析天平，可精确至±0.0001g
玻璃样品瓶：8mL
内衬管：200 μL
移液枪（10μL，200 μL，1000 μL，5000μL各一把）
冰箱（-20℃）
8mL样品瓶架
2mL进样瓶
0.22μm针式滤膜
一次性滴管
色谱柱：Agilent HP-5MS 30m*0.25mm*0.25μm

7. 样品制备

7.1 精确称量0.5g（若样品为脱臭馏出物，称0.2g）椰子油样品(精确至0.0001g)于8mL玻璃样品瓶中，准确加入100μL的内标溶液（5.2），加入5.0mL乙腈，涡旋振荡3min，放入-20℃冰箱中冷冻2h净化。

7.2 取上清液过0.22μm滤膜，至200μL内衬管中，GCMSMS测定。

8.仪器参数

8.1气相条件

(a) 进样体积：1μL

(b) 进样器：不分流

(c) 载气：氦气(99.999%)

(d) 恒定流速：1.2 mL/min

(e) 气相色谱柱温箱程序：初始温度50℃，等温保持1 min，以20℃/min升温到280℃，

等温保持8 min。

(f) SSL温度：280℃

8.2. 质谱条件

8.2.1质谱检测器：电子-轰击(EI)离子源，选择离子监测模式(SIM)，AUX(280℃)，离子源(250℃)，溶剂延迟6min。多反应监测(MRM)条件如表1所示：

表1 联苯，2-苯基苯酚和蒽醌及其内标的保留时间及MS/MS条件

化合物	英文简写	保留时间（min）	母离子（M/Z）	定量离子（M/Z）	碰撞能量（ev）	定性离子（M/Z）	碰撞能量（ev）	对应内标
联苯	Biph	7.64	153.9	152.0	32	115.0	37	Biph-d10
联苯-D10	Biph-d10	7.62	163.9	160.0	40	158.0	52
2-苯基苯酚	Biphoh	8.60	169.9	115.0	43	141.0	28	Biph-d10
蒽醌	AN	11.15	208.0	179.9	12	152.0	32	AN-d8
蒽醌-D8	AN-d8	11.13	216.0	188.1	12	160.1	32

9．计算：

样品中联苯，2-苯基苯酚和蒽醌的含量计算公式如下：

W为样品中联苯，2-苯基苯酚和蒽醌的含量，单位为mg /kg；

C为由标准曲线计算出的样品中(联苯，2-苯基苯酚和蒽醌)的含量，单位为ng/mL；

M为样品的称样量，单位为g；

5 为提取液乙腈的体积，单位为mL。

小结：

采用简单的乙腈提取稀释的低温冷冻快速前处理方法，结合稳定同位素内标法准确定量技术测定椰子油中联苯，2-苯基苯酚和蒽醌。本方法前处理简单快速，无需特别的净化，降低了检测成本，提高了检测效率，同时避免了净化过程中目标物损失，适合对大批量椰子油样品中联苯，2-苯基苯酚和蒽醌的快速、准确定量检测。

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