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【实战宝典】如何设置橙皮苷液相色谱检测方法的检测时间？

小官人

2021/03/23

液相色谱（LC）

问题描述：按照2005版药典的方法，橙皮苷在液相色谱中的出峰时间是多少？如何设置检测时间？

解答：（1）采用液相色谱法进行分析时，待测物质的出峰时间与色谱柱类型、流动相种类、流速、柱温等因素有关。

（2）可以尝试下面的色谱条件进行分析，橘皮苷的出峰时间约为18min，色谱条件如下：色谱柱为JADE PAK ODS柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为甲醇：水：冰醋酸（V/V）=33:63:2；等度洗脱；流速为1.0mL/min；柱温25℃；进样量为5μL；检测波长为284nm。

（3）药典方法中待测物质的出峰时间通常是小于30min的，因此新方法开发时，检测时间可以先设置为30min左右。但是受分析条件、物质性质与仪器性能的影响，也会遇到出峰时间超过30min的情况，可以通过重复进样的方式进行排查，连续重复进样时会隔几针出现一个相同的谱图，此时可以适当延长检测时间。

（4）药典方法中虽然规定了色谱柱类型、流动相、理论塔板数、检测波长等条件，但是可以通过适当调整流速、柱温等条件缩短待测物质出峰时间。

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