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【实战宝典】液相色谱分析糖类需要注意的问题有哪些？

小官人

2021/03/23

液相色谱（LC）

问题描述：请问色谱柱：Agilent ZORBAXCarbohydrate Analysis Column，是氨基柱还是糖柱？这根柱子能分离左旋葡聚糖、木糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖吗？生物油水相中含有一定量的乙酸，乙酸在这个柱子上会不会出峰？需不需要梯度洗脱，流动相用什么？

解答：（1）糖柱顾名思义就是可以分析糖类物质的色谱柱，包括氨基键合相、酰胺键合相、钙基-离子交换柱等众多类型色谱柱。“Agilent ZORBAX Carbohydrate Analysis Column”是安捷伦公司的分析糖类等碳水化合物的专用分析柱，该色谱柱基体填料为硅胶颗粒，表面键合3-氨基丙基硅烷分子，本质上是一款硅胶为担体的氨基柱。

（2）乙酸在溶液中以乙酸根离子状态存在，理论上不会在该色谱柱上保留，而且糖类分析一般要用示差折光或蒸发光散射检测器，乙酸一般不会在这两种检测器上出峰。

（3）氨基柱是十分适合分离各种糖类的正相色谱柱，可以用反相色谱流动相（如乙腈+水/三乙胺），省去了反相、正相液相色谱系统的切换。建议参考利用氨基柱分析糖类的相关文献，再根据自己的仪器优化流动相组成，如乙腈和水的比例、需不需要添加三乙胺改善峰型等。需要注意的是使用示差检测器就不能用梯度洗脱，如果打算用梯度洗脱可以考虑蒸发光散射检测器。

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