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【实战宝典】为何TLC方法与HPLC方法检测药材提取液结果不一致？

小官人

2021/03/23

液相色谱（LC）

问题描述：药材提取液先做TLC检测，极性较小的A物质跑的高，极性较大的B物质跑的低一些；而做HPLC检测时，极性较小的A物质却先出峰了，为什么两者结果会不一致？

解答：（1）HPLC和TLC固定相的填料不一样，不同的填料其选择性会产生差异，从而导致出峰顺序的变化。

（2）流动相极性、pH、柱温等参数的变化都会引起出峰顺序的改变，从而在分析时需要采用标准品或者对照品确认待测物质的出峰时间或出峰顺序。

（3）出峰顺序与分离机理也有一定的关系，相似相溶原理只是色谱分离中的一种机理，另外还有离子交换、化学键合等。不同机理作用下，分析条件稍有不同都可能影响色谱峰出峰顺序的改变。

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