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【实战宝典】为什么测定沙星类物质时样品与标样保留时间不一致？

小官人

2021/03/24

液相色谱（LC）

问题描述：液相色谱检测沙星类物质，提取液为乙腈：50％HCl（V/V）=2500：20，流动相为四丁基溴化胺（pH＝3）。由于检测时标准品和样品的pH不同，样品酸性强，导致样品中沙星类物质出峰时间和标准相差比较大，如何解决？

解答：该实验步骤中沙星类提取试剂盐酸质量分数为0.04%，pH值约为2，与流动相pH=3有一定差距，导致沙星类在样品中的保留时间漂移，样品中保留时间与标样不一致。解决方法可以从以下两方面着手：

（1）将样品pH值调节到与流动相一致（pH=3），但由于样品溶剂（乙腈+盐酸）和流动相（四丁基溴化铵）差别还是比较大，虽然pH调节差不多了，也不能保证两者保留时间一定会完全一致。

（2）将提取液直接旋蒸浓缩后用流动相定容，或经过SPE小柱净化，有机试剂洗脱后氮气吹干，用流动相复溶，然后检测。

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