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液相色谱开发时,对物质进行用紫外扫描确定最大吸收波长,溶剂是要用流动相还是什么都行?

  • Ins_ee1524fc
    2021/06/01
  • 私聊

新手上路

  • 液相色谱开发时,对物质进行用紫外扫描确定最大吸收波长,溶剂是要用流动相还是什么都行?
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  • dahua1981

    第1楼2021/06/02

    应助达人

    优先选择流动相,一般原则原则:
    (1)溶剂对于待测样品。必须具有合适的极性和良好的选择性。
    (2)溶剂要与检测器匹配。对于紫外吸收检测器,应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长。所谓溶剂的紫外截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时,溶剂对此辐射产生强烈吸收,此时溶剂被看作是光学不透明的,它严重干扰组分的吸收测量。对于折光率检测器,要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相,以达最高灵敏度。
    (3)高纯度。由于高效液相灵敏度高,对流动相溶剂的纯度也要求高。不纯的溶剂会引起基线不稳,或产生“伪峰”。痕量杂质的存在,将使截止波长值增加50~IOOnm。
    (4)化学稳定性好。不能选与样品发生反应或聚合的溶剂。
    (5)低粘度。若使用高粘度溶剂,势必增高压力,不利于分离。常用的低粘度溶剂有丙酮、乙醇、乙晴等。但粘度过于低的溶剂也不宜采用,例戊烷、乙醚等,它们易在色谱柱或检测器内形成气泡,影响分离.

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  • JOE HUI

    第2楼2021/06/02

    应助达人

    检测波长的选择涉及到以下2方面的因素:
    1,目标物质在该波长处有较大(往往不是最大)吸收。
    2,与目标物质同时经过检测器流通池的其他物质(主要是流动相与样品溶剂)在该波长有较小吸收。

    文献中有大量的检测同一物质用的波长却不一样的情况,就是在这两者之间取一最佳平衡点。

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  • 梦醒了

    第3楼2021/06/02

    谢谢,有学到

    JOE HUI(xurunjiao5339) 发表:检测波长的选择涉及到以下2方面的因素:1,目标物质在该波长处有较大(往往不是最大)吸收。2,与目标物质同时经过检测器流通池的其他物质(主要是流动相与样品溶剂)在该波长有较小吸收。 文献中有大量的检测同一物质用的波长却不一样的情况,就是在这两者之间取一最佳平衡点。

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  • 梦醒了

    第4楼2021/06/02

    太长了,感谢,明天再细看

    dahua1981(dahua1981) 发表:优先选择流动相,一般原则原则:(1)溶剂对于待测样品。必须具有合适的极性和良好的选择性。(2)溶剂要与检测器匹配。对于紫外吸收检测器,应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长。所谓溶剂的紫外截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时,溶剂对此辐射产生强烈吸收,此时溶剂被看作是光学不透明的,它严重干扰组分的吸收测量。对于折光率检测器,要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相,以达最高灵敏度。(3)高纯度。由于高效液相灵敏度高,对流动相溶剂的纯度也要求高。不纯的溶剂会引起基线不稳,或产生“伪峰”。痕量杂质的存在,将使截止波长值增加50~IOOnm。(4)化学稳定性好。不能选与样品发生反应或聚合的溶剂。(5)低粘度。若使用高粘度溶剂,势必增高压力,不利于分离。常用的低粘度溶剂有丙酮、乙醇、乙晴等。但粘度过于低的溶剂也不宜采用,例戊烷、乙醚等,它们易在色谱柱或检测器内形成气泡,影响分离.

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