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求助!LC-ESI-MS自上而下法定量蛋白,不经过酶解是如何打出高价离子的?

  • Ins_528c1331
    2021/07/17
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 我实验室的质谱仪是AB SCIEX 5500QTRAP,尝试过用纯蛋白,按文献中前处理的步骤和溶液比例进行检测,未果。文献中的质谱仪是Waters XEVO TQS triple quadrupole

    请问各位大佬,是不是因为仪器是硬伤,还是因为其他一些参数呢?如何打出文献图中的高价母离子呢,对应的子离子是可以预测的吗?
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  • 歪果仁zZ

    第1楼2021/07/17

    应助达人

    两家仪器对应的型号都是三重四级杆,sciex5500并不存在仪器硬件的弱点,反而大多时候其性能会优于水家。建议针对高分子量区间先用校机液把仪器高质量区间的质量轴校准一下,然后在Q1扫描时选择800Da-1500Da区间扫描,通过小幅度修改源气参数看能否提高目标离子的响应。需要您仔细优化参数后再把离子峰图发给我们分析,具体问题具体分析,应该可以做到的,加油!

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  • 卐解

    第2楼2021/08/01

    5500扫描范围是5到1250Da,所以。。。
    可以尝试利用API4000或者API 6500

    歪果仁zZ(v3255306) 发表:两家仪器对应的型号都是三重四级杆,sciex5500并不存在仪器硬件的弱点,反而大多时候其性能会优于水家。建议针对高分子量区间先用校机液把仪器高质量区间的质量轴校准一下,然后在Q1扫描时选择800Da-1500Da区间扫描,通过小幅度修改源气参数看能否提高目标离子的响应。需要您仔细优化参数后再把离子峰图发给我们分析,具体问题具体分析,应该可以做到的,加油!

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  • 叮叮当当

    第3楼2021/08/02

    应助达人

    蛋白在质谱上容易出多电荷锋,实际我们测到的正离子加H峰是加1,再除1,多电荷是分子量加2,再除2,加3再除3。同理负离子减2再除2。一个物质能带1电荷,2电荷,3电荷等多种,相互佐证即可证明是该物质

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